[发明专利]一种睾丸间质干细胞的分离、培养方法及其用途有效
申请号: | 201410469363.X | 申请日: | 2014-09-15 |
公开(公告)号: | CN104212763B | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 项鹏;姜美花;蔡炳;臧志军;汪建成 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/52;A61P5/26 |
代理公司: | 广州凯东知识产权代理有限公司44259 | 代理人: | 姚迎新 |
地址: | 510000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种睾丸间质干细胞的分离、培养方法及其用途,本发明所提供的方法包括利用7天或2个月小鼠,分离睾丸,去除被膜和血管,暴露生精小管后用胶原酶IV消化,过滤消化后的细胞悬液;通过CD51的细胞特异标记,利用流式细胞仪进行分选,获得单个细胞,收集表达CD51的细胞,从而分离出所述CD51阳性睾丸间质干细胞。本发明提供了根据上述方法分离的睾丸间质来源干细胞,以及进一步在培养基中培养获得的自我更新和增殖、具有多向分化潜能的细胞,并且提供了将这些细胞用于制备治疗睾酮水平低下导致的相关疾病的组合物的用途。 | ||
搜索关键词: | 一种 睾丸 间质 干细胞 分离 培养 方法 及其 用途 | ||
【主权项】:
一种睾丸间质干细胞的分离方法,其特征在于:所述的分离方法是选择7天或2个月龄小鼠,分离小鼠睾丸,用胶原酶IV消化睾丸组织,过滤消化后的细胞悬液,滤过筛网,获得单个细胞,所述细胞用CD51抗体进行标记;以IgG标记的对照样本细胞为阴性对照细胞,将用CD51抗体进行标记的单个细胞通过流式细胞仪进行分选,收集CD51荧光强度是阴性对照细胞的荧光强度的10倍或以上的细胞,从而分离出CD51阳性的睾丸间质干细胞。
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