[发明专利]一种乳腺癌体外三维细胞模型的建立及其在药物耐药机制、逆转剂筛选研究中的应用有效
| 申请号： | 201410471270.0 | 申请日： | 2014-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN104232584B | 公开（公告）日： | 2017-05-10 |
| 发明（设计）人： | 王广基;张经纬;鲁萌;周芳 | 申请（专利权）人： | 中国药科大学 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211198 江苏省南京*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种乳腺癌体外三维细胞模型的建立及其在药物耐药机制、逆转剂筛选研究中的应用。运用“3D no base and embedded”方法将一定量的人乳腺癌MCF‑7细胞种植在Millicell细胞培养小室上，通过培养形成厚度为40μm，层数达到10～12层的人乳腺癌MCF‑7细胞的三维多层细胞模型。在MCF‑7多层细胞模型上单用及联用P‑GP抑制剂LY335979对化疗药物阿霉素的转运动力学及摄取行为考察证明其在培养过程中发生耐药现象；并将其应用于阿霉素耐药逆转剂人参皂苷20(S)‑Rh2的筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 乳腺癌 体外 三维 细胞 模型 建立 及其 药物 耐药 机制 逆转 筛选 研究 中的 应用 | ||
【主权项】：
一种体外人乳腺癌MCF‑7三维多层细胞模型，其特征在于：运用“3D no base and embedded”方法将一定量的人乳腺癌MCF‑7细胞种植在Millicell细胞培养小室上，通过十天的培养形成厚度为40μm，层数达到10～12层的人乳腺癌MCF‑7细胞的三维多层细胞模型；所述的“3D no base and embedded”方法为：MCF‑7细胞消化、计数，用含6％Matrigel的预冷无血清RPMI1640培养基重悬细胞；以2*105cells/孔的密度接种于24孔Millicell细胞培养小室中；冰上静置30min后放入37℃，5％CO2的孵箱中培养4h；待胶液凝固后，内外室分别补加400ul及600ul 10％含血清的RPMI1640培养基继续培养十天，并隔天换液。
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