[发明专利]一种重组腺相关病毒rAAV载体的分离纯化方法无效
申请号: | 201410474564.9 | 申请日: | 2014-09-17 |
公开(公告)号: | CN104232687A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
发明(设计)人: | 许瑞安;曲伟红 | 申请(专利权)人: | 许瑞安 |
主分类号: | C12N15/864 | 分类号: | C12N15/864 |
代理公司: | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 | 代理人: | 杨厚;王为 |
地址: | 福建省厦门市集美*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明涉及一种重组腺相关病毒载体(rAAV)的分离纯化方法,通过添加磷灰石色谱中的钙离子,有效地改善磷灰石色谱对rAAV载体的结合与分离能力,通过所述方法获得的病毒载体,其纯度与二次氯化铯离心方法相当,并具有体内外生物活性,该方法纯化的重组腺相关病毒载体有望用于基因治疗。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 相关 病毒 raav 载体 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种重组腺相关病毒载体rAAV的分离纯化方法,其特征是,所述方法是将rAAV载体细胞裂解液或细胞培养上清液经核酸内切酶处理,在钙离子存在下,采用磷灰石色谱与经缓冲液处理的细胞裂解液或者上清液中的rAAV载体结合,再经含钙离子的洗涤缓冲溶液洗涤和不含钙离子的洗脱缓冲溶液洗脱,然后经阴离子色谱进一步分离纯化rAAV。
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