[发明专利]一种RGD修饰的超小磁性氧化铁纳米颗粒的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种RGD修饰的超小磁性氧化铁纳米颗粒的制备方法，以乙酰丙酮铁为反应原料和前驱物，油胺为表面活性剂和还原剂，二苄醚为溶剂制备超小磁性氧化铁纳米颗粒；利用多巴胺化的HOOC‑PEG‑COOH对纳米颗粒表面包裹的油胺分子进行替换，实现纳米颗粒表面的PEG化修饰；最后通过PEG末端的游离羧基化学偶联RGD环肽，得到RGD修饰的超小磁性氧化铁纳米颗粒。本发明中合成超小磁性氧化铁纳米颗粒的方法具有工艺简单，原料转化率高、可重复性强等特点，合成出的磁性氧化铁纳米颗粒具有形貌规则、尺寸超小、稳定性好、单分散性良好、生物相容性高、具有肿瘤特异性靶向等特点，可用作具有肿瘤主动靶向功能的T1加权成像高性能磁共振造影剂。

主权项

一种RGD修饰的超小磁性氧化铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、超小磁性氧化铁纳米颗粒的制备将二苄醚和油胺按体积比1：9～9：1混合，氮气气氛下，再加入乙酰丙酮铁，以2～6℃/min加热至190～230℃，保持0.5～1.5h；之后以2～6℃/min加热至290℃，保持15～45min；冷却至室温，洗涤，得到超小磁性氧化铁纳米颗粒，保存于异辛烷中备用；其中，乙酰丙酮铁在反应溶液体系中浓度为0.125～0.175mol/L；步骤二、超小磁性氧化铁纳米颗粒表面进行PEG修饰以多巴胺盐酸盐、α,ω‑双{2‑[(3‑羧基‑1‑氧丙基)氨基]乙基}聚乙二醇为反应原料，以N‑羟基琥珀酰亚胺、N,N’‑二环己基碳二亚胺为偶联剂，在三氯甲烷和N,N‑二甲基甲酰胺混合溶剂中进行化学偶联，制备多巴胺化的α,ω‑双{2‑[(3‑羧基‑1‑氧丙基)氨基]乙基}聚乙二醇；将步骤一分散于异辛烷的超小磁性氧化铁纳米颗粒滴加到多巴胺化的α,ω‑双{2‑[(3‑羧基‑1‑氧丙基)氨基]乙基}聚乙二醇中，在200～800rpm下反应6～18h，洗涤，超声分散于去离子水中，调节pH至6～9，透析、过滤，低温保存备用；步骤三、超小磁性氧化铁纳米颗粒表面进行RGD修饰以1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺、N‑羟基琥珀酰亚胺为偶联剂，在pH4.5～6.5的2‑(N‑吗啉)乙磺酸缓冲溶液中对步骤二得到的超小磁性氧化铁纳米颗粒表面修饰的PEG分子末端游离羧基进行活化，之后超滤离心，洗涤，得到活化后的超小磁性氧化铁纳米颗粒；将RGD环肽溶解于pH7～9的硼砂盐缓冲溶液中，再加入活化后的超小磁性氧化铁纳米颗粒，振荡反应12～24h，透析、过滤，得到所述RGD修饰的超小磁性氧化铁纳米颗粒；制备得到的RGD修饰的超小磁性氧化铁纳米颗粒表面PEG化密度≥1个/nm2，RGD偶联密度≥0.5个/nm2；颗粒粒径≤6nm，平均水动力尺寸≤25nm，饱和磁化强度20～60emu/g，纵向弛豫率r1为3～10mM‑1s‑1，横向弛豫率r2与纵向弛豫率r1比值r2/r1≤3。