[发明专利]抗体-高分子结合体、其荧光衍生物及它们的制备方法

摘要

抗体‑高分子结合体、其荧光衍生物及它们的制备方法。所述抗体包含至少一个二硫键或自由的巯基，所述高分子通过连接到所述抗体的二硫键或自由的巯基而结合到所述抗体上。所述方法通过在抗体的特定位点进行修饰并原位生长高分子及其荧光衍生物；或者预先制备了高分子及其荧光衍生物，再与抗体的特定位点偶联制备抗体‑高分子结合体及其荧光衍生物。本发明的方法简便高效，并且所制备产物不仅保留抗体原有的生物活性而且提高抗体的水溶性、稳定性、药代动力学、生物分布和治疗功效，并降低其免疫原性，此外本发明制备抗体‑高分子荧光衍生物与传统方法制备的抗体‑荧光标记物相比，具有更强的荧光信号和检测信号强度。

主权项

1.一种制备抗体-高分子结合体及其荧光衍生物的方法，其中，所述抗体包含至少一个二硫键或自由的巯基，所述高分子通过连接到所述抗体的二硫键或自由的巯基而结合到所述抗体上，所述方法包括：a1)制备抗体-引发剂的结合体，其中所述引发剂结合到所述抗体的二硫键或自由的巯基上；b1)所述抗体-引发剂结合体在缓冲液中与高分子单体或者与高分子单体以及荧光单体混合，在催化剂作用下引发所述高分子单体聚合而制备出所述抗体-高分子结合体或抗体-高分子结合体的荧光衍生物，在步骤a1)中，所述抗体的二硫键被还原成自由的巯基，然后所述引发剂连接到所述巯基上，所述引发剂分子是化学式1、化学式2或化学式3中的至少一个：化学式1～3中，R1为能够引发原子转移自由基聚合反应的官能团或其官能团衍生物；其中，能够引发原子转移自由基聚合反应的官能团选自2-溴代-2-甲基丙酰胺、2-氯代-2-甲基丙酰胺、2-溴代丙酰胺、2-氯代丙酰胺、2-溴代-2-甲基丙酸酯、2-氯代-2-甲基丙酸酯、2-溴代丙酸酯、2-氯代丙酸酯；R2和R3相同或不同，R2和R3各自独立地选自容易被亲核取代的官能团及所述官能团的衍生物，所述容易被亲核取代的官能团选自H、I、Br、Cl、C6H5S、CH3C6H5S、对甲苯环磺酰基的至少一种，化学式2中R2和R3不能同时为H；X和Y相同或不同，X和Y各自独立地选自NH、O、S、Se原子；Z包括N或者CH，所述高分子单体选自丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯、丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺中的至少一种，所述荧光单体选自丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯、丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺中的至少一种，所述荧光单体的荧光基团选自荧光素及其衍生物，罗丹明及其衍生物，花菁类荧光染料，香豆素类荧光染料，氟硼荧类荧光染料，酞菁类荧光染料中的至少一种，其中，所述抗体选自医药、农业、科研以及其它工业领域相关的抗体。