[发明专利]重组α‑银环蛇毒素αBtx的制备方法

摘要

本发明公开了一种重组α‑银环蛇毒素αBtx的制备方法，所述方法包括如下步骤(1)优化重组α‑银环蛇毒素(αBtx)的编码序列，优化后的编码序列如SEQ ID NO.15所示；(2)以SEQ ID NO.15所示编码序列为基础，构建重组α‑银环蛇毒素(rαBtx)的表达载体；(3)将表达载体转化大肠杆菌，构建αBtx重组表达工程菌，培养rαBtx重组表达工程菌后，以IPTG诱导rαBtx表达。

主权项

重组α ‑银环蛇毒素α Btx 的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)优化重组α ‑银环蛇毒素α Btx 的编码序列,优化后的编码序列如 SEQ ID NO.15 所示;(2)以 SEQ ID NO.15 所示编码序列为基础,构建重组α ‑银环蛇毒素α Btx 的表达载体; 具体步骤为：构建含有序列如 SEQ ID NO.1 至 4 所示的表达载体; 将含有SEQ ID NO.1 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxNdB, 将含有SEQ ID NO.2 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxNdB2,将含有SEQ ID NO.3 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxNcB,将含有SEQ ID NO.4 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxNcB2; 然后以表达载体 BtxNcB 和 BtxNcB2 为基础,构建含有序列如 SEQ ID NO.5 和 6 所示的表达载体,将含有SEQ ID NO.5 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxT60NcB,将含有SEQ ID NO.6 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxT60NcB2; 再以表达载体 BtxT60NcB 和 BtxT60NcB2 为基础,构建含有序列如 SEQ ID NO.7 至 14 所示的表达载体，将含有SEQ ID NO.7 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxS5NcB,将含有SEQ ID NO.8 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxS5NcB2,将含有SEQ ID NO.9 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxS7NcB,将含有SEQ ID NO.10 所示 序列的表达载体命名为表达载体 BtxS7NcB2,将含有SEQ ID NO.11 所示序列的表达 载体命名为表达载体 BtxS11NcB,将含有SEQ ID NO.12 所示序列的表达载体命名为 表达载体 BtxS11NcB2,将含有SEQ ID NO.13 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxS12NcB,将含有SEQ ID NO.14 所示序列的表达载体命名为表达载体 BtxS12NcB2；(3)将表达载体转化大肠杆菌,构建α Btx 重组表达工程菌,培养α Btx 重组表达工程菌后,以 IPTG 诱导α Btx 表达。