[发明专利]一种采用PCR方法扩增粪便细粒棘球绦虫DNA的方法在审
| 申请号： | 201410491712.8 | 申请日： | 2014-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN104195261A | 公开（公告）日： | 2014-12-10 |
| 发明（设计）人： | 陈启龙;马嵋;张亚楼;王雪梅 | 申请（专利权）人： | 陈启龙;马嵋 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 830000 新疆维吾尔自治区乌*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种采用PCR方法扩增粪便细粒棘球绦虫DNA的方法，具体为，(1)PCR反应总体积为25μl，包括0.1μg BSA、pH9.2 104μmol/L Tri s-HCl、2.5×104μmol/L KCl、1.5×103μmol/LMgCl2、200μmol/L dNTP、0.4μmol/L引物、2.5UTaq酶及2.5μl DNA样品；上游引物Eglf：5′-CATTAATGTATTTTGTAAAGT-TG-3，下游引物Eglr：5′-CACATCATCTTA-CAATAACACC-3′；目的片段大小为255bp；(2)热循环参数：95℃预变性5min；95℃30s；53.5℃30s；72℃45s；共40次循环；72℃后延伸10min；(3)1.5％琼脂糖电泳检测PCR产物。本发明所带来的有益效果是：采用PCR方法检测前需对粪便进行加热处理，消除了虫卵的感染力。PCR方法不仅可以区分形态上相似的虫卵，还可能对虫卵数做出预测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 采用 pcr 方法 扩增 粪便 细粒 绦虫 dna | ||
【主权项】：
一种采用PCR方法扩增粪便细粒棘球绦虫DNA的方法，其特征在于，具体为，(1)PCR反应总体积为25μl，包括0.1μg BSA、pH9.2 104μmol/L Tris‑HCl、2.5×104μmol/L KCl、1.5×103μmol/LMgCl2、200μmol/L dNTP、0.4μmol/L引物、2.5UTaq酶及2.5μl DNA样品；上游引物Eglf：5′‑CATTAATGTATTTTGTAAAGT‑TG‑3，下游引物Eglr：5′‑CACATCATCTTA‑CAATAACACC‑3′；目的片段大小为255bp；(2)热循环参数：95℃预变性5min；95℃30s；53.5℃30s；72℃45s；共40次循环；72℃后延伸10min；(3)1.5％琼脂糖电泳检测PCR产物。
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