[发明专利]一种合浦珠母贝大片段DNA的提取方法在审

专利信息
申请号: 201410498929.1 申请日: 2014-09-26
公开(公告)号: CN104293768A 公开(公告)日: 2015-01-21
发明(设计)人: 邱萤;喻达辉;张东玲;黄桂菊;范嗣刚 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院南海水产研究所;集美大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人: 宣国华
地址: 510300 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 一种合浦珠母贝大片段DNA的提取方法,包括以下步骤:选取合浦珠母贝闭壳肌组织,粉碎,加入月桂酸钠提取缓冲液、蛋白酶K和RNaseA三种试剂,进行合浦珠母贝闭壳肌组织消化,得消化液;将消化液置于冰上冷却后,加入等体积的酚、氯仿和异戊醇混合液,混匀后,离心,取上清液;在上清液中加入等体积的氯仿和异戊醇混合液,离心,取上清液;在上清液中加入异丙醇,在冰上放置后摇匀至白色沉淀出现完全,静置沉淀,离心,取上清液;在上清液中加入酒精洗涤后离心,除去酒精,所得沉淀物即为合浦珠母贝大片段DNA。该方法能从合浦珠母贝闭壳肌组织中提取到高浓度、大片段的DNA,且该方法简便易行,不耗时,能提高DNA的提取效率。
搜索关键词: 一种 合浦 珠母 片段 dna 提取 方法
【主权项】:
一种合浦珠母贝大片段DNA的提取方法,其特征是包括以下步骤:(1)选取合浦珠母贝闭壳肌组织,粉碎,加入月桂酸钠提取缓冲液、蛋白酶K和RNase A三种试剂进行合浦珠母贝闭壳肌组织消化,得消化液;(2)将消化液置于冰上冷却后,加入等体积的酚、氯仿和异戊醇混合液,混匀后,离心,取上清液;(3)在步骤(2)所得上清液中加入等体积的氯仿和异戊醇混合液,离心,取上清液;(4)在步骤(3)所得上清液中加入异丙醇,在冰上放置后摇匀至白色沉淀出现完全,静置沉淀,离心,取上清液;(5)在步骤(4)所得上清液中加入酒精洗涤后离心,除去酒精,所得沉淀物即为合浦珠母贝大片段DNA。
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