[发明专利]一种毛细管电泳检测酚酸和/或丹参酮类成分的方法

摘要

本发明涉及一种毛细管电泳检测酚酸和/或丹参酮类成分的方法，可实现对丹参药材和生物体液中不同酚酸和丹参酮成分的毛细管电泳分离，毛细管柱中填充缓冲溶液，所述缓冲溶液的成分为石墨化多壁碳纳米管的终浓度为3～9μg/mL、十二烷基硫酸钠B的浓度20～50mmol/L、异丙醇体积分数7.5％‑15％、硼砂5～20mmol/L、pH值为7～9，其中石墨化多壁碳纳米管以碳纳米管分散液的形式加入，对样品进行毛细管电泳检测，并根据对照品的标准曲线计算得到样品中酚酸和丹参酮成分的含量。本发明首次将表面活性剂功能化的石墨化多壁碳纳米管作为新型固定相加入到溶液中，形成稳定性好、分散均匀的缓冲溶液，对酚酸和丹参酮成分能起到很好的分离效果，在丹参药材和生物体液检测方面取得了显著的效果。

主权项

一种毛细管电泳检测酚酸和/或丹参酮类成分的方法，所述酚酸和/或丹参酮类成分是指酚酸类成分或丹参酮类成分中的一种或两种以上，所述酚酸类成分为香草酸、迷迭香酸、丹参素钠、丹酚酸A、丹酚酸C、咖啡酸、原儿茶酸、丹酚酸B，所述丹参酮类成分为二氢丹参酮、丹参酮IIA，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)配制碳纳米管分散液，所述碳纳米管分散液的成分为：40μg/mL石墨化多壁碳纳米管，17.5mmol/L十二烷基硫酸钠A、体积分数10％正丁醇，以水为溶剂；取碳纳米管分散液、十二烷基硫酸钠B、异丙醇和硼砂配制缓冲溶液，使缓冲溶液中石墨化多壁碳纳米管的终浓度为3～9μg/mL、十二烷基硫酸钠B的浓度20～50mmol/L、异丙醇体积分数7.5％‑15％、硼砂5～20mmol/L、pH值为7～9，以水为溶剂，配制时将上述混合液于25～30℃下超声5～10分钟，过滤、制得缓冲溶液；(2)取含有酚酸和/或丹参酮类成分的待测样液150μL至1.5mL离心管中，再加150μL甲醇和200μL空白缓冲溶液，涡旋3秒，滤过，取续滤液作为样品液进样，进行毛细管电泳检测，毛细管柱中填充步骤(1)制得的缓冲溶液；二极管阵列检测器检测，检测波长205nm，得到样品液的毛细管电泳色谱图；所述空白缓冲溶液的成分为：十二烷基硫酸钠30mmol/L、异丙醇体积分数10％、硼砂10mmol/L、pH值为8，25～30℃下超声5～10分钟，过滤、制得空白缓冲溶液；(3)以丹酚酸B的对照品配制不同浓度的对照品溶液，按照步骤(2)相同条件电泳条件进行毛细管电泳色谱检测，获得丹酚酸B对照品的毛细管电泳色谱图，以丹酚酸B对照品的浓度为横坐标，以丹酚酸B对照品溶液的毛细管电泳色谱图中色谱峰的峰面积为纵坐标制作丹酚酸B标准曲线，按同样方法制作香草酸标准曲线、迷迭香酸标准曲线、丹参素钠标准曲线、丹酚酸A标准曲线、丹酚酸C标准曲线、咖啡酸标准曲线、二氢丹参酮标准曲线、丹参酮IIA标准曲线、原儿茶酸标准曲线；根据样品液的毛细管电泳色谱图中相应色谱峰的峰面积及各成分的标准曲线计算样品液中香草酸、迷迭香酸、丹参素钠、丹酚酸A、丹酚酸C、咖啡酸、二氢丹参酮、丹参酮IIA、原儿茶酸、丹酚酸B含量，根据稀释比例相应换算得到待测样液中香草酸、迷迭香酸、丹参素钠、丹酚酸A、丹酚酸C、咖啡酸、二氢丹参酮、丹参酮IIA、原儿茶酸、丹酚酸B含量。