[发明专利]一种具有高转糖苷活性的β‑半乳糖苷酶组合突变体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201410514519.1 | 申请日： | 2014-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN104263710B | 公开（公告）日： | 2017-12-19 |
| 发明（设计）人： | 张伟;张宇宏;刘波;孙宁;张佳琳 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N9/38 | 分类号： | C12N9/38;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19 |
| 代理公司： | 北京万慧达知识产权代理有限公司11111 | 代理人： | 杨颖,张金芝 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程和遗传工程领域，公开了一种具有高转糖苷活性的β‑半乳糖苷酶组合突变体，其是在去除了自身信号肽的亮白曲霉和米曲霉的β‑半乳糖苷酶的氨基酸序列的基础上，通过双位点的定点饱和突变所获得的，在低聚糖生成量保持不变的情况下，该突变体的转糖苷反应速率比野生型提高100％以上。同时，本发明还公开了编码上述组合突变体的DNA分子、含有上述DNA分子的重组表达载体以及表达上述DNA分子的宿主细胞。此外，本发明还提供了采用上述重组表达载体制备具有高转糖苷活性的β‑半乳糖苷酶的方法以及上述组合突变体、DNA分子、重组表达载体和宿主细胞在制备β‑半乳糖苷酶中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 具有 糖苷 活性 半乳糖 组合 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种具有高转糖苷活性的β‑半乳糖苷酶组合突变体，其是在序列2或序列4所示的亮白曲霉或米曲霉β‑半乳糖苷酶氨基酸序列的基础上，通过双位点的定点饱和突变所获得的，其中双位点的定点饱和突变为用甘氨酸残基取代第219位的丝氨酸残基(S219G)和用缬氨酸残基取代第785位的谷氨酸残基(E785V)。
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