[发明专利]区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法及应用

摘要

本发明公开了一种区域选择性合成多糖磷酸酯的方法，属生物高分子及化学合成技术领域。本发明利用空间位阻较大的保护基保护多糖伯羟基，区域选择性合成了高活性圆头蒿多糖磷酸酯，拓展了圆头蒿多糖作为天然活性物质的应用。动物活性试验表明，本发明合成的圆头蒿多糖磷酸酯对HepG2肝癌细胞具有显著的体外抑制HepG2细胞的作用（IC₅₀为12.41~25.56mg/mL），可作为HepG2肝癌细胞的抑制剂，用于制备抗癌药物。

主权项

区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，包括以下工艺步骤：（1）圆头蒿多糖溶液的制备：将圆头蒿多糖充分溶解于无水N,N‑二甲基甲酰胺中，得到圆头蒿多糖溶液；（2）圆头蒿多糖伯羟基的保护：将三苯基氯甲烷溶解于吡啶后加入到上述圆头蒿多糖溶液中，于60℃~80℃反应12~24h；反应结束降至室温，依次用蒸馏水、无水乙醇洗涤后，于0.06~0.08MPa下抽滤，滤饼干燥后，得到伯羟基保护的圆头蒿多糖；（3）伯羟基保护的圆头蒿多糖的磷酸化：将伯羟基保护的圆头蒿多糖溶于无水N,N‑二甲基甲酰胺，加入磷酸化试剂，N₂保护下，于40~60℃反应1~3小时，冷却至0~5℃，用碱液中和至pH=7~8；于室温、0.06~0.08MPa下抽滤；滤液装入截流量为8000~12000道尔顿的透析袋中，先于流水中透析36~72小时，再于去离子中透析18~36小时；然后将透析袋内液体减压浓缩至原体积的1/20~1/40；用乙醇进行沉淀，离心，固体冷冻干燥，得磷酸化伯羟基保护的圆头蒿多糖；（4）圆头蒿多糖保护基的脱除：将磷酸化伯羟基保护的圆头蒿多糖加入到二氯乙酸中，在室温下搅拌反应30~60min，用无水乙醇沉淀后离心；固体冷冻干燥，得区域选择性取代的圆头蒿多糖磷酸酯。