[发明专利]1;2;4-丁三醇相关蛋白在生物法制备1;2;4-丁三醇中的应用

摘要

本发明公开了1,2,4‑丁三醇相关蛋白在生物法制备1,2,4‑丁三醇中的应用。本发明也涉及编码该酶的核苷酸序列，被导入核苷酸序列的重组宿主以及利用重组宿主制备1,2,4‑丁三醇的方法。本发明提供的酶可以催化木糖生物合成1,2,4‑丁三醇途径中的关键步骤，该酶的应用显著提高了重组宿主1,2,4‑丁三醇的生产能力。本发明还构建了利用木糖生产1,2,4‑丁三醇能力提高的重组大肠杆菌。

主权项

1.重组细胞的构建方法，包括对受体细胞进行A1)、A2)、A3)、A4)、A5)、A6)和A7)的改造得到重组细胞的步骤：A3)将所述受体细胞的木糖异构酶基因敲除；A5)向所述受体细胞中导入木糖脱氢酶基因；A6)向所述受体细胞中导入醇脱氢酶基因；A7)向所述受体细胞中导入1,2,4‑丁三醇相关蛋白基因；A1)将所述受体细胞的2‑酮酸脱氢酶基因敲除；A2)将所述受体细胞的3‑脱氧‑D‑甘油‑戊酮糖酸醛缩酶基因敲除；A4)将所述受体细胞的木酮糖激酶基因敲除；所述受体细胞为大肠杆菌BW25113；所述2‑酮酸脱氢酶基因为2‑酮酸脱氢酶基因ycdW和2‑酮酸脱氢酶基因yiaE；所述3‑脱氧‑D‑甘油‑戊酮糖酸醛缩酶基因为3‑脱氧‑D‑甘油‑戊酮糖酸醛缩酶基因yagE和3‑脱氧‑D‑甘油‑戊酮糖酸醛缩酶基因yjhH；所述木糖异构酶基因为木糖异构酶基因xylA；所述木酮糖激酶基因为木酮糖激酶基因xylB；所述醇脱氢酶基因为醇脱氢酶基因adhP；所述木糖脱氢酶基因为木糖脱氢酶基因xdh；所述1,2,4‑丁三醇相关蛋白基因为SEQ ID No.2的第71‑1717位核苷酸所示的cDNA分子或基因组DNA。