[发明专利]一种虎杖组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及通过植物组织培养技术的植物再生，具体为一种虎杖组织培养快速繁殖的方法。该方法包括以下步骤：（1）外植体的选取与灭菌，选取健壮、无病虫害的野生虎杖带腋芽幼嫩枝条作为外植体，并对其进行消毒处理；（2）不定芽的诱导，将步骤（1）中的外植体切成长2-3cm的单芽茎段，分别接种于诱导培养基中进行诱导培养，培养条件：温度为25±2℃，光照强度1500-2000lux，光照时间14-16h；（3）不定芽的继代培养等步骤。本发明中所述的方法快速、高效、成本低，移栽成活率高，便于推广，遗传稳定性好，缩短了虎杖的育苗周期，为今后进行工业化生产提供了可靠地来源和物质基础。

主权项

一种虎杖组织培养快速繁殖方法，其特征在于该方法包括以下步骤：（1）外植体的选取与灭菌选取健壮、无病虫害的野生虎杖带腋芽幼嫩枝条作为外植体，并对其进行消毒处理；（2）不定芽的诱导将步骤（1）中的外植体切成长2‑3cm的单芽茎段，分别接种于诱导培养基中进行诱导培养为不定芽，培养条件为：温度为25±2℃，光照强度1500‑2000lux，光照时间14‑16h；（3）不定芽的继代培养经过步骤（2）诱导的不定芽接种于继代培养基中，继续继代培养，培养条件同步骤（2）；（4）诱导生根经过继代培养后的虎杖不定芽长至4‑6cm后，将其直接诱导生根，将步骤（3）中的不定芽剪切成含有2‑3个节且带顶芽的茎段接种于生根培养基中，培养条件：温度为25±2℃，光照强度1600‑2000 lux，光照时间14‑16h；（5）驯化带步骤（4）中生根苗植株长至4‑6cm、生根条数达5‑6条，且根长度为3‑4cm时，将其移至自然条件下炼苗2d，2d后将其盖打开继续炼苗4‑5d，备用；（6）试管苗的移栽将步骤（5）中驯化好的虎杖植株将其从培养瓶中取出，洗净根部的培养基；用800倍质量百分含量为50%的多菌灵可湿性粉剂浸泡2‑3h，稍晾干根部水分即可进行移栽，移栽入经高温消毒过的营养土、自然土壤和蛭石体积比0.1‑1:1‑2:0.5‑1的混合基质的营养钵并置于温室中，并随时注意保湿，20d后将其直接移栽至大田中。