[发明专利]一种便捷、快速的科博肽分离提取工艺

摘要

本发明属于生物医药提取技术领域，具体涉及一种便捷、快速的科博肽分离提取工艺。该方法采用Sephadex G‑50柱将处理后的蛇毒原液按不同相对质荷比的分子由大至小一一分开，分离筛分出目标E峰,再用阳离子CM‑32交换层析柱对目标E峰进行分离纯化，冷冻干燥，得到科博肽；该方法工艺简单，易于操作，质量较好控制，大大缩短了生产周期，降低了生产成本；最终产物纯度大于97%，更适合于工业大生产。

主权项

1.一种便捷、快速的科博肽分离提取工艺，其特征在于：包括以下步骤：(1)、Sephadex G‑50用注射用水膨胀，装柱后用pH7.9‑8.1的0.01M磷酸缓冲液平衡；(2)、CM‑32用注射用水溶胀后用0.5M氢氧化钠反应30min后,冲洗至中性；再用0.5M盐酸反应30min后，冲洗至中性，装柱，用pH7.9‑8.1的0.01M磷酸缓冲液平衡；(3)、眼镜蛇粗毒加3‑5倍量pH7.9‑8.1的0.01M磷酸缓冲液溶解，3000rpm离心10min，待用；(4)、经离心后的蛇毒溶液上平衡后的Sephadex G‑50柱，pH7.9‑8.1的0.01M磷酸缓冲液洗脱，流速30‑50ml/h，自动部分收集器收集滤液；(5)、24小时后，紫外分光光度计检测收集，收集E峰，所述E峰是相对质荷比是7000左右的组分；(6)、收集的E峰上平衡后的CM‑32柱，用pH7.9‑8.1的0.01M磷酸缓冲液洗脱16h后，换含0.10M氯化钠的磷酸缓冲液洗脱，流速50‑70ml/h，24小时后开始检测收集液，收集目的峰，收集的目的峰，冷冻干燥，即得科博肽。