[发明专利]石油降解菌群与表面活性剂联合降解水中脱水原油的方法

摘要

本发明涉及环境生物技术领域，旨在提供一种石油降解菌群与表面活性剂联合降解水中脱水原油的方法。具体步骤如下：(1)取石油污染土壤样品，放入装有石油烃降解菌培养基的三角瓶到前述三角瓶中培养5天；取部分培养液转移至新的培养基中，加入原油继续培养5天；重复进行再培养3次后得到石油烃降解菌群；(2)取培养基和石油烃降解菌群，加入脱水原油后加入表面活性剂，恒温振荡培养以降解所加入的脱水原油。本发明能以彻底、高效、低成本的方式修复顽固脱水原油对环境的危害；本发明中富集菌群的方法简便、快捷，仅使用本发明中得到的菌群即可以在35天把10mg原油降解88％，与仅使用菌群降解相比，降解效率加快一倍。

主权项

石油降解菌群与表面活性剂联合降解水中脱水原油的方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)石油烃降解菌群的富集：a：将65mg K₂HPO₄、25.5mg KH₂PO₄、133.8mg Na₂HPO₄·12H₂O、500mg NH₄Cl、82.5mg CaCl₂、67.5mg MgSO₄·7H₂O、0.75mg FeCl₃·6H₂O和1000mL去离子水进行混合，调节pH值为7.0；取配制好的溶液100mL加入到1L的三角瓶中，在120℃温度下灭菌20min，得到装有石油烃降解菌培养基的三角瓶；b：称取1g石油污染土壤样品，放入到前述三角瓶中；三角瓶放置在恒温振荡箱中，保持温度30℃、转速180r/min，培养5天；c：按步骤a中方法获得第二个有石油烃降解菌筛选培养基的三角瓶，吸取10mL步骤b三角瓶中的培养液转移至该第二个三角瓶中，并加入0.01g原油，然后将该第二个三角瓶放置在恒温振荡箱中，保持温度30℃、转速180r/min，培养5天；d：吸取10mL步骤c中经5天培养后的培养液，并按照步骤c的方法进行再培养；重复再培养3次后，最终得到的液体为石油烃降解菌群；(2)加入表面活性剂对脱水原油进行降解：取上述步骤(1)的步骤a中获得的石油烃降解菌培养基10mL，取上述步骤(1)的步骤d中得到的石油烃降解菌群1mL，一并放入到50mL的三角瓶中；然后在该三角瓶中加入脱水原油0.01g；再加入表面活性剂1mL；放置在恒温振荡箱中，保持在温度30℃、转速180r/min条件下进行培养以降解所加入的脱水原油。