[发明专利]一种用于莫能霉素快速检测的酶联免疫试剂盒

摘要

本发明提供了一种能检测动物源食品中莫能霉素的残留量的酶联免疫试剂盒，涉及免疫分析检测技术。该试剂盒包括：包被了莫能霉素抗原的酶标板；莫能霉素抗体；莫能霉素标准品；标准品稀释液；酶标二抗；底物显色液；洗涤缓冲液和终止液。本发明的关键技术在于制备了一种莫能霉素的单克隆抗体。本发明的试剂盒采用此高特异性的莫能霉素单克隆抗体，主要试剂以工作液形式提供，可以减少操作步骤，节省时间，尤其是肉类产品中莫能霉素的残留量。

主权项

一种用于莫能霉素快速检测的酶联免疫试剂盒，其特征在于它包含下列成分：（1）包被了莫能霉素抗原的酶标板；（2）莫能霉素抗体；（3）莫能霉素标准品；（4）标准品稀释液；（5）酶标二抗；（6）底物显色液；（7）洗涤缓冲液；（8）终止液；其中，本发明的试剂盒所用试剂的配制方法如下：（1）莫能霉素标准溶液配制：准确称取标准莫能霉素1 mg，精确到0.00001 g，配成1 μg/mL标准品溶液母液；使用时，用标准品稀释液稀释成所需的浓度（10‑1000 ng/mL）；（2）标准品稀释液为0.05 mol/L Tris‑HCl，pH 8.0，0.9%NaCl的缓冲液；（3）包被缓冲液为0.1 mol/L碳酸缓冲液，pH7.8，含0.05% NaN₃，0.9% NaCl；（4）封闭液为0.05 mol/L Tris‑HCl溶液，pH8.0，含0.5% BSA，0.9% NaCl，0.04% NaN₃；（5）洗涤缓冲液为0.05 mol/L Tris‑HCl，pH 8.0，0.9% NaCl，0.04% Tween20；（6）莫能霉素单克隆抗体工作液：将抗体用pH7.4，0.02 mol/L，含1%卵清蛋白的磷酸盐缓冲液稀释成蛋白浓度为0.1‑1 ug/L使用；（7）酶标二抗工作液：辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗；（8）底物显色液A液：过氧化氢或过氧化脲；（9）底物显色液B液：邻苯二胺（OPD）或四甲基联苯胺（TMB）；（10）底物显色液对硝基磷酸盐缓冲液：pH8.1，含有MgCl₂ 0.01% 100 mmol/L Tris‑HCl；（11）终止液：2 mol/L硫酸。