[发明专利]一种建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的烟粉虱种群的方法有效
申请号: | 201410539648.6 | 申请日: | 2014-10-11 |
公开(公告)号: | CN104285906A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
发明(设计)人: | 杨义婷;郭建洋;万方浩;刘万学;刘怀 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | A01K67/033 | 分类号: | A01K67/033 |
代理公司: | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人: | 高宇 |
地址: | 100093 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及昆虫侵染型内共生菌种群的建立,具体为一种建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的烟粉虱种群的方法。所述方法包括以下步骤:采集烟粉虱种群,在实验室培养;选取出若干烟粉虱于显微镜下观察辨别雌雄;吸取雌雄烟粉虱各一头,接于甜瓜叶片的背面;培养;提取单头烟粉虱的DNA,然后利用PCR方法对其DNA进行分子鉴,纯化至得到稳定的种群。根据本发明的技术方案,模拟烟粉虱自然生存条件下的生活条件建立种群,没有导致烟粉虱的生物学特性的改变,可以准确的得出Rickettisa菌对烟粉虱造成的影响。 | ||
搜索关键词: | 一种 建立 含有 rickettisa 烟粉虱 种群 方法 | ||
【主权项】:
一种建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的烟粉虱种群的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)采集烟粉虱种群,在实验室培养,其中光照条件为白天14h:黑夜10h,相对湿度为75%~85%;(2)待种群量相对较大时,选取出若干烟粉虱于显微镜下观察辨别雌雄;(3)取已长出两片真叶的甜瓜苗,用养虫笼夹在甜瓜苗的叶片上,吸取雌雄烟粉虱各一头,接于甜瓜叶片的背面;(4)3‑4天过后,将养虫笼的烟粉虱取出,将甜瓜在以下条件下培养,光照条件为白天14h:黑夜10h,相对湿度为75%~85%;(5)提取单头烟粉虱的DNA,然后利用PCR方法对其DNA进行分子鉴定,所用引物如以下,利用烟粉虱内共生菌鉴定引物,鉴定种群内共生菌情况,引物序列(5′→3′)F:CGCTTCAGCAATTACCGTR:GAACTACTACACCTCCAA;(6)待烟粉虱羽化后,取同一养虫笼里的雌雄烟粉虱,重复(3)~(5)步骤;(7)纯化至得到稳定的种群。
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