[发明专利]一种小通草悬浮细胞的快速繁殖方法在审
| 申请号： | 201410540620.4 | 申请日： | 2014-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN104255520A | 公开（公告）日： | 2015-01-07 |
| 发明（设计）人： | 刘东锋;杨成东 | 申请（专利权）人： | 南京帝道农业科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211225 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明研究了一种小通草悬浮细胞的快速繁殖方法，包括小通草无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养及优化等步骤，本发明采用组织培养方法可以获得大量的小通草悬浮细胞，品质好，次生代谢物含量高，为小通草药用资源的开发和利用提供研究基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通草 悬浮 细胞 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】：
一种小通草悬浮细胞的快速繁殖方法，包括小通草无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养及优化，其主要步骤如下：（1）取小通草幼嫩的叶片，对其进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的小通草幼嫩叶片接入DKW+ZT1.0mg/L+2，4‑D0.15mg/L+地霉素5mg/L，附加0.7%琼脂和30g/L蔗糖的培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.90，暗光照培养，温度25℃；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基DKW+TDZ0.04mg/L+ZT2.0mg/L进行愈伤组织增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.90，光照1500lx，温度25℃；（4）取步骤（3）增殖出来结构松散的愈伤组织接入1/3MS+ZT1.0mg/L+IAA0.01mg/L+甘氨酸15‑20ppm+丝氨酸8‑10ppm+苯丙氨酸4‑5ppm+半胱氨酸8‑10ppm培养基中进行悬浮细胞培养，附加蔗糖30g/L，pH5.9，光照2000lx，温度25℃。
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