[发明专利]一种单分子细胞检测方法及其应用和单分子细胞检测试剂盒在审
| 申请号： | 201410541542.X | 申请日： | 2014-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN104313139A | 公开（公告）日： | 2015-01-28 |
| 发明（设计）人： | 张春阳;胡娟 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;G01N33/574;G01N33/569 |
| 代理公司： | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;熊永强 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种单分子细胞检测方法及其应用和单分子细胞检测试剂盒。所述单分子细胞检测方法包括如下步骤：1)提供捕获探针和报告探针，所述捕获探针包括第一配体和修饰在所述第一配体上的生物素分子；所述报告探针包括第二配体和修饰在所述第二配体上的荧光分子；2)提供待测细胞，所述待测细胞的表面具有受体分子，所述第一配体和第二配体具有特异性结合所述受体分子的结构域；3)在结合缓冲液中加入所述报告探针、捕获探针和待测细胞，富集到探针-细胞-磁珠复合物；4)在步骤(3)所得的探针-细胞-磁珠复合物中加入洗脱缓冲液，加热，离心，取上清液进行单分子荧光检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分子 细胞 检测 方法 及其 应用 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种单分子细胞检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1)提供捕获探针和报告探针，所述捕获探针包括第一配体和修饰在所述第一配体上的生物素分子；所述报告探针包括第二配体和修饰在所述第二配体上的荧光分子；2)提供待测细胞，所述待测细胞的表面具有受体分子，所述第一配体和第二配体具有特异性结合所述受体分子的结构域；3)在结合缓冲液中加入所述报告探针、捕获探针和待测细胞，混匀后孵育0.5～2小时，再离心去上清，然后加入链霉亲和素标记的磁珠，室温孵育20～60分钟时间后，磁分离2～10分钟，富集到探针‑细胞‑磁珠复合物；4)在步骤(3)所得的探针‑细胞‑磁珠复合物中加入洗脱缓冲液，80～95℃下加热2～10分钟，离心，取上清液进行单分子荧光检测。
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