[发明专利]菊花抗蚜性关联分子标记、筛选方法及应用有效

专利信息
申请号: 201410568698.7 申请日: 2014-10-22
公开(公告)号: CN104313150A 公开(公告)日: 2015-01-28
发明(设计)人: 陈发棣;王楚楚;苏江硕;张飞;管志勇;陈素梅;王海滨;房伟民 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 徐冬涛
地址: 211225 江苏省南京市溧*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明属于生物技术领域,提供菊花抗蚜性关联分子标记、分子标记引物、分子标记筛选方法及上述三者在菊花新品种培育上的应用。菊花抗蚜性关联分子标记包括主效QTL位点NoaE2G1、NoaE2G7、NoaE1H3、NoaE2H7、NoaE2H8的分子标记。其筛选方法包括:(1)试验材料及其表型数据的获得;(2)菊花连锁图谱构建;(3)菊花抗蚜性状的QTL定位;(4)菊花抗蚜性状关联分子标记的确定。解决了目前菊花抗蚜性状基因的精确定位和克隆的研究在国内外几乎空白这一现状,筛选出与菊花蚜虫抗性基因紧密关联的分子标记,建立菊花抗蚜性分子标记辅助选择体系,提高菊花抗蚜性选择效率,为菊花新品种的选育奠定基础。
搜索关键词: 菊花 抗蚜性 关联 分子 标记 筛选 方法 应用
【主权项】:
一种菊花抗蚜性关联分子标记的筛选方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:(1)、试验材料及其表型数据的获得:第一年选择抗蚜性状差异明显的两个菊花品种进行人工杂交,获得F1杂交种子,次年点播,连同亲本扦插苗,常规管理同大田;选取生长健壮、长势一致的6~8叶龄扦插苗作为人工蚜虫接种的供试材料,进行连续两年的蚜虫接种试验,根据菊花品种蚜量比值的不同,进行抗蚜性性状分析;对抗蚜性性状在两个年份的表型数据分别进行基本描述性统计分析;(2)、菊花连锁图谱构建:a.提取亲本及其F1杂交后代基因组DNA;b.利用亲本及8‑10个F1杂交子代对SRAP、SSR引物组合和SCoT引物进行多态性筛选,将筛选出的多态性引物用于作图群体的多态性扩增并统计扩增后的多态性条带数据;c.运用JoinMap4.0软件,选用‘CP作图模型’,设置LOD为3.0,分别对双亲的分离位点进行连锁分析,获得双亲的分子标记连锁群,再用Mapchart2.2软件绘制连锁图;(3)、菊花抗蚜性状的QTL定位:结合表型数据和分子遗传图谱,运用Win QTL5.0软件及复合区间作图法进行菊花抗蚜性的QTL分析,并估算各QTL的遗传参数:加性效应、对表型变异的贡献率、最大LOD值、QTL在相应连锁群上的位置、与最近分子标记的距离;(4)、菊花抗蚜性状关联分子标记的确定:根据步骤(3)所得的主效QTL所在的标记区间即可确定与菊花抗蚜性状紧密关联的分子标记。
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