[发明专利]脊髓灰质炎灭活疫苗及其生产方法有效
| 申请号： | 201410570519.3 | 申请日： | 2014-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN104312981B | 公开（公告）日： | 2017-09-19 |
| 发明（设计）人： | 王辉;赵玉秀;李爱灵;梁宏阳;刘小娟;赵硕;董圆;曾令冰 | 申请（专利权）人： | 北京北生研生物制品有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;A61K39/13;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京三友知识产权代理有限公司11127 | 代理人： | 韩蕾 |
| 地址： | 100176 北京市北京经济*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种脊髓灰质炎灭活疫苗及其生产方法。所述的脊髓灰质炎灭活疫苗是应用篮式生物反应器以Vero细胞为基质生产的，具体包括在篮式生物反应器中加入M199培养基，接种Vero细胞培养，至长成致密单层后，用Earle's平衡盐溶液洗换；洗换结束后注入M199培养基液，接种脊髓灰质炎病毒，病毒接种MOI为0.01～0.3，继续培养，病毒培养温度33±0.5℃，溶氧40～80％，并控制病毒培养阶段体系pH值为7.4～7.6；接种后培养42～72小时收获病毒液。本发明通过选择合适的培养基并控制适宜的培养温度、pH值、接种比例、溶氧等条件，病毒滴度高、抗原含量高，批间差异高度可控，质量均一。 | ||
| 搜索关键词： | 脊髓灰质炎 疫苗 及其 生产 方法 | ||
【主权项】：
一种脊髓灰质炎灭活疫苗的生产方法，该方法包括步骤：在篮式生物反应器中加入高糖M199培养基作为细胞生长液，接种Vero细胞进行培养，至长成致密单层后，应用Earle's平衡盐溶液进行洗换；洗换结束后注入M199培养基液作为细胞生长液，进行脊髓灰质炎病毒Sabin株的接种，病毒接种MOI为0.01～0.3，继续培养，病毒培养温度33±0.5℃，溶氧40～80％，并控制病毒培养阶段体系pH值为7.4～7.6；病毒接种后培养42～72小时，收获病毒液；其中，所述Vero细胞培养阶段中的生长液为高糖M199培养基，其初始葡萄糖含量为5.0～6.0g/L；在Vero细胞培养过程中，当接种细胞40～60小时后，开启灌流生长液，并设定灌流量为2～6L/day，维持细胞生长体系中的葡萄糖含量在2.0～3.0g/L；并且，控制篮式反应器搅拌桨转速为：接种细胞阶段搅拌桨转速为110～130rpm；培养细胞阶段转速为70～90rpm；接种病毒阶段转速为90～110rpm；培养病毒阶段转速为70～90rpm。
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