[发明专利]一种自体外周血淋巴细胞CIK的培养方法有效
| 申请号： | 201410573311.7 | 申请日： | 2014-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN104371974B | 公开（公告）日： | 2017-03-22 |
| 发明（设计）人： | 何学松;何南海;叶晓峰;林晓峰;杨东晖;路杨 | 申请（专利权）人： | 杭州阿诺生物医药科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310018 浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种自体外周血淋巴细胞的培养方法，包括如下步骤（1）从外周血中分离单个核细胞，重悬于X‑VIVO15无血清培养基中，使细胞浓度为1×106 个/mL，培养3天；（2）补加X‑VIVO15无血清培养基至100 mL，添加IL‑2 1×103 U/mL，培养1天；（3）补加X‑VIVO15无血清培养基至200‑240 mL，添加IL‑2 1×103 U/mL，培养3天；（4）补加X‑VIVO15无血清培养基至1000 ml，添加IL‑2 1×103 U/mL、CTLA‑4mAb 100 ng/mL、PD‑1mAb 100 ng/mL；（5）培养5‑7天，制得自体外周血淋巴细胞。本发明通过向X‑VIVO15无血清培养基中添加多种单抗及细胞因子，提高效应细胞群活化效率和扩增效率。特别是体外加载CTLA‑4、PD‑1抗体以覆盖所有CIK细胞表面的CTLA‑4、PD‑1分子，有效的降低了T调节细胞的含量，进一步提高CIK细胞对肿瘤的杀伤作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体外 淋巴细胞 cik 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种自体外周血淋巴细胞CIK的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)从外周血中分离外周血单个核细胞，重悬于X‑VIVO15无血清培养基中，使外周血单个核细胞的细胞浓度为1×106个/mL，静置培养3天；(2)向步骤(1)制得的培养液中补加X‑VIVO15无血清培养基至100mL，同时添加IL‑2，使IL‑2的浓度为1×103U/mL，静置培养1天；(3)向步骤(2)制得的培养液中补加X‑VIVO15无血清培养基至200‑240mL，同时添加IL‑2，使IL‑2的浓度为1×103U/mL，静置培养3天；(4)将步骤(3)制得的培养液中补加X‑VIVO15无血清培养基至1000mL，同时添加IL‑2，使IL‑2的浓度为1×103U/mL，添加CTLA‑4mAb 100ng/mL、PD‑1mAb 100ng/mL；(5)将步骤(4)制得的培养液静置培养5‑7天，制得自体外周血淋巴细胞CIK。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于杭州阿诺生物医药科技股份有限公司，未经杭州阿诺生物医药科技股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410573311.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
