[发明专利]一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质及其制备方法、用途在审
| 申请号： | 201410578270.0 | 申请日： | 2014-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN104387472A | 公开（公告）日： | 2015-03-04 |
| 发明（设计）人： | 王华倩;周小芬;林卫萍;张焜;王真史;杜志云;郑希;方岩雄;赵肃清;黄宝华 | 申请（专利权）人： | 广东工业大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/70;A61K38/16;A61P25/00;A61P25/28;A61P25/16 |
| 代理公司： | 广州市南锋专利事务所有限公司 44228 | 代理人： | 刘媖 |
| 地址： | 510006 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质及其制备方法、用途。利用不相容的双质粒系统在大肠杆菌中表达霍乱毒素B亚基，和增强型绿色荧光蛋白、霍乱毒素A亚基、穿膜肽三种蛋白的融合蛋白EGFP-CTA2-TAT，通过PCR扩增得到CTB基因，将该基因片段克隆到载体pET-28a中，获得重组质粒pET-28a-CTB；以野生型CTA2、EGFP、TAT氨基酸序列为模板，在EGFP与CTA2之间插入3个酶切位点和linker，优化获得适宜在大肠杆菌中表达的密码子，将基因片段克隆到载体PET-22b（+）中，获得重组质粒PET-22b-EGFP-CTA2-TAT；利用PET-28a-CTB和PET-22b-EGFP-CTA2-TAT二者不同抗性，将其共转化到大肠杆菌BL21中，在氨苄青霉素和卡那青霉素的双抗性选择压力下，筛选获得工程菌，该工程菌经IPTG诱导表达后，可获得CTB5/EGFP-CTA2-TAT嵌合蛋白。本发明同时公开了该蛋白质的制备方法及用途。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 具有 靶向 作用 多亚基 蛋白质 及其 制备 方法 用途 | ||
【主权项】：
一种具有脑靶向作用的多亚基蛋白质，其特征在于：由一个氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的EGFP‑CTA2‑TAT亚基和五个氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的CTB亚基构成。
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