[发明专利]一种苦瓜白粉病菌的保存方法

摘要

本发明公开一种苦瓜白粉病菌的保存方法，是将病叶上的白粉菌接种到易感病的离体苦瓜叶片上，待叶片上产生新的白粉层后，挑出单个孢子或单条孢子梗，接种到无菌苗的离体叶片上进行纯化，产生新菌落后再接种到无菌苦瓜子叶上，待子叶表面产生新菌落时，再密封保存。在离体条件下，本方法可保存苦瓜白粉病菌150d以上。本发明是在人工条件下对苦瓜白粉病的进行纯化和保存，本方法具有占用空间小，保存时间可控的优点，本发明为苦瓜白粉病的鉴定和防治，苦瓜抗白粉病新品种的选育和苦瓜白粉病菌生物学研究提供了极大方便，具有较高的应用价值。

主权项

一种苦瓜白粉病菌的保存方法，其具体步骤如下：(1)苦瓜白粉病菌的诱导：先将苦瓜病叶上的白粉菌接种到健康离体苦瓜叶片上，然后将离体苦瓜叶片放入培养皿中，密封置于光暗交替条件下保湿培养，诱导新的白粉病菌；(2)苦瓜无菌叶片和无菌子叶的准备：将易感病材料的种子消毒后接种于培养基中，获得无菌苗后，将长至宽3cm左右的叶片切下放入培养皿中待用；从下胚轴1cm处切下带子叶的茎段并去掉侧芽，插入每孔盛有3ml营养液的12孔细胞培养板孔内，将细胞培养板放入消毒的带盖盒子中待用；(3)苦瓜白粉病菌的纯化：无菌条件下，将诱导新生成的白粉病菌，在解剖镜下挑出单个孢子或单条孢子梗，接种到准备好的无菌苗离体叶片上，密封置于光暗交替条件下保湿培养纯化；(4)苦瓜白粉病菌的保存：将纯化后的白粉病菌接种到插入盛有营养液的细胞培养板孔内的无菌子叶上，再将细胞培养板放入消毒的带盖盒子中，密封置于光暗交替条件下进行培养，待子叶表面生产新的菌落后，再置于温度10～12℃，光暗8h/16h条件下保存。