[发明专利]一种利用微藻同时生产叶黄素和油脂的方法

摘要

本发明公开了一种利用微藻同时生产叶黄素和油脂的方法，包括以下步骤：(1)微藻细胞的收集；(2)微藻细胞的称取；(21)叶黄素的提取进和(22)油脂的提取过程；同时设有对叶黄素和油脂提取顺序对调的试验以确定最优化的提取顺序和水平。本发明采用超声波对微藻进行破碎，超声波的空化效应和醇溶解作用具有更佳的协同效果，利于细胞的破碎机细胞内油脂成分扩散；利用甲醇—二氯甲烷作为提取溶剂，叶黄素的提取效果最佳，而且剩余藻体的油脂损失较少，通过对叶黄素的提取工艺进行正交优化，在最优工艺条件下得到的叶黄素提取率为94.59％，比优化前提高了1.43倍，剩余藻体的油脂含量为32.56％，叶黄素提取前后原始小球藻油脂的脂肪酸组成基本上没有变化。

主权项

一种利用微藻同时生产叶黄素和油脂的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)微藻细胞的收集：在微藻培养的后期，利用离心的方式收集微藻细胞干燥粉；(2)微藻细胞的称取：准确称取0.1g的步骤(1)所得到的微藻细胞干燥粉；(21)叶黄素的提取：针对步骤(2)中得到的微藻细胞，加入适量的提取溶剂，振荡混匀后对微藻用超声波破碎仪进行破碎，利用离心的方法提高细胞浓度，控制离心转数5500～8000r/min，离心时间为5～10min，收集溶液上清，定容，测定叶黄素含量，整个过程需要在避光条件下进行；(22)油脂的提取：针对步骤(2)中得到的微藻细胞，加入3～4mol/L的盐酸6ml，振荡混合均匀后，放置室温静置20～30min，然后放置沸水浴10～15min后，转入－80℃低温冰箱冷冻15～25min，重复上述冻融三次；再加入氯仿和甲醇提取液，充分振荡混合均匀，离心转数5500～8000r/min，离心时间为5～10min，将下层氯仿层转入新容器中烘干即得油脂；(3)叶黄素和油脂提取顺序的确定：将上述步骤(21)和步骤(22)的叶黄素的提取和油脂的提取的顺序分别对调进行两组实验，即一组先进行油脂的提取，测定油脂含量；剩余藻体再提取叶黄素，测定叶黄素含量；另一组实验先提取叶黄素，测定叶黄素含量；剩余藻体再提取油脂，测定油脂含量。