[发明专利]一株低内毒素大肠杆菌原核表达工程菌突变株及构建方法有效
| 申请号： | 201410592119.2 | 申请日： | 2014-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN104388368B | 公开（公告）日： | 2017-02-15 |
| 发明（设计）人： | 孔庆科;刘琼;刘青;赵新新 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙)51238 | 代理人： | 黎祖琴 |
| 地址： | 625014 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一株低内毒素大肠杆菌原核表达工程菌突变株及构建方法，属于生物工程技术领域。它是通过将细菌基因组上调控类脂A脂肪酸链合成的msbB基因以及pagP基因通过自杀性质粒以及同源重组的方法敲除，从而减少类脂A的脂肪酸链的数量，达到降低其脂多糖毒性的目的，并且通过外源低拷贝表达质粒表达pagL以及lpxE蛋白，同时去除类脂A的脂肪酸链以及磷酸基团来达到降低菌株内毒素活性的目的。利用上述技术构建的低内毒素大肠杆菌原核表达工程菌突变株Escherichia coli BL21 (DE3) S004，保藏号为 CCTCC NO.M2014473，保藏时间为2014年10月14日，其产生的脂多糖刺激细胞表现明显的内毒素活性下降，能够为后续用该工程菌表达用于治疗的外源蛋白和靶向药物打下基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一株低 内毒素 大肠杆菌 表达 工程 突变 构建 方法 | ||
【主权项】：
一株低内毒素大肠杆菌原核表达工程菌突变株，其特征在于：所述突变株不含与脂肪酸链转移酶合成有关的基因msbB和pagP，同时能表达去除脂肪酸链的酶pagL以及去磷酸基团的酶lpxE；所述突变株的分类命名为Escherichia coli BL21(DE3)S004，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO.M2014473，保藏时间为2014年10月14日。
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