[发明专利]单细胞转录组测序文库的构建方法及其应用在审
| 申请号： | 201410601383.8 | 申请日： | 2014-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN104389026A | 公开（公告）日： | 2015-03-04 |
| 发明（设计）人： | 王大伟;王苗英;蒋智;李明洲;朱海浩;刘运超 | 申请（专利权）人： | 北京诺禾致源生物信息科技有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人： | 吴贵明;张永明 |
| 地址： | 100085 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种单细胞转录组测序文库的构建方法及其应用。该构建方法包括以下步骤：对单细胞中的RNA进行反转录得到cDNA；用扩增引物对cDNA进行预扩增，得到扩增cDNA；对扩增cDNA进行片段化文库构建，得到单细胞的转录组测序文库；其中，扩增引物中的dTTP替换为dUTP。本发明的上述构建方法，通过将预扩增引物中的dTTP替换为dUTP，使得在接头连接之后的酶消化步骤能将带接头片段中含有预扩增引物的片段打断，并在后续高温预变性及变性步骤中去除，进而减少了带预扩增引物的片段的扩增，使得产出的测序数据中带有预扩增引物污染的数据比例也大大下降，从而大大提高了产出数据的有效数据量。 | ||
| 搜索关键词： | 单细胞 转录 序文 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种单细胞转录组测序文库的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：对单细胞中的RNA进行反转录得到cDNA；用扩增引物对所述cDNA进行预扩增，得到扩增cDNA；对扩增cDNA进行片段化文库构建，得到单细胞的转录组测序文库；其中，将扩增引物中的dTTP替换为dUTP。
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