[发明专利]基于纳米金及LSCM反射光模式的细胞成像方法

摘要

本发明提供了一种基于纳米金及LSCM反射光模式的细胞成像方法，该方法将特异性的靶向分子组装到纳米金颗粒表面，在LSCM下可直接观察到该探针，将其与细胞共培养后，可利用LSCM观察细胞内部及表面的纳米金生物探针的数量、分布及形态。本发明方法通过种子生长法制备40-50nm的纳米金，在其表面修饰与细胞表面的特异性受体相对应的靶向分子作为生物探针，该探针能大量的粘附在细胞表面或进入细胞内，将其与细胞共培养，洗涤并固定后，采用LSCM(激光扫描共聚焦显微镜)反射光的模式来观察纳米金的反射光，可以较为便捷的实现细胞的LSCM成像。

主权项

一种基于纳米金及LSCM反射光模式的细胞成像方法，其特征在于，将特异性的靶向分子组装到纳米金颗粒表面构成探针，在LSCM下可直接观察到该探针与细胞共培养后，利用LSCM观察细胞内部及表面的纳米金生物探针的数量、分布及形态；所述方法包括如下步骤：(1)采用柠檬酸三钠还原制得金种溶液；(2)采用种子生长法制得大粒径的纳米金溶液；(3)将靶向分子加入到步骤(2)制备的纳米金溶液中，混合均匀，进行组装；(4)组装好的溶液离心洗涤；(5)洗涤后得到纳米金生物探针，将该探针用细胞培养基重悬浮；(6)将(5)处理后的纳米金生物探针加入到细胞中，于培养箱中与细胞共培养；(7)将细胞用缓冲液洗涤并用多聚甲醛固定后，即可在激光共聚焦扫描显微镜下观察成像。