[发明专利]一种大豆DNA的提取方法在审
| 申请号： | 201410609628.1 | 申请日： | 2014-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN104450677A | 公开（公告）日： | 2015-03-25 |
| 发明（设计）人： | 刘曼;逄淑梅;牟特 | 申请（专利权）人： | 青岛康大分析检测有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 史霞 |
| 地址： | 266400 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，涉及一种大豆DNA的提取方法。一种大豆DNA的提取方法，主要步骤包括：首先将大豆粉碎成粉末状，与CTAB裂解缓冲液充分混合裂解，然后加入酚：氯仿：异戊醇抽提蛋白，离心后上清液加入氯仿：异戊醇进行抽提，离心后上清液加入等体积的异丙醇进行沉淀30min，离心弃上清，保留沉淀，再用无水乙醇溶液洗涤沉淀，离心后的沉淀干燥后用TE溶解，加入RNAse酶37℃孵育30min，所得溶液即为大豆DNA溶液，-20℃贮存备用。本发明的大豆DNA的提取方法的有益效果是：可以从大豆干种子中提取到高质量的适宜于PCR检测的基因组DNA，操作简单、耗时短、利于快速检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大豆 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种大豆DNA的提取方法，包括以下步骤:（1）首先将大豆粉碎成粉末状，分别称取0.1g制备好的样品，加入到两支2ml离心管中；（2）加入2%CTAB裂解缓冲液，震荡混匀，65℃孵育30min；（3）加入酚：氯仿：异戊醇，震荡均匀，12000r/min离心20min；（4）吸取上清液，放入1.5ml离心管中，加入氯仿：异戊醇，震荡均匀，12000r/min离心15min；（5）吸取上清液，放入另一1.5ml离心管中，加入等体积的异丙醇，沉淀30min，12000r/min离心10min；（6）弃去上清，加入无水乙醇溶液洗涤，12000r/min,离心1min；（7）弃去上清，沉淀室温干燥，加入50ul TE溶液溶解沉淀；（8）加入5ulRNAse酶溶液，37℃孵育30min，‑20℃贮存备用。
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