[发明专利]一种1‑1型人血浆结合珠蛋白提取液的制备方法

摘要

本发明公开了一种1‑1型人血浆结合珠蛋白提取液的制备方法，将低温保存的含1‑1型结合珠蛋白的人血浆离心上清依次进行硫酸铵分级沉淀和聚乙二醇沉淀，以提取1‑1型人血浆结合珠蛋白供精细纯化使用。本方法制备的提取液中1‑1型人血浆结合珠蛋白纯度大于50％，低温操作、方法温和，非常适合作为从人血浆中大规模纯化1‑1型结合珠蛋白的粗提取方法。

主权项

一种1‑1型人血浆结合珠蛋白提取液的制备方法，其特征在于，在0℃环境条件下按照以下步骤进行：1）取低温冷藏的含有1‑1型结合珠蛋白的人血浆充分冰浴，高速离心取上清液；2）步骤1）所得上清液中加入硫酸铵，至0℃时硫酸铵的最终饱和度为35~40%，冰浴20~30 min后高速离心，取上清液加入硫酸铵，至0℃时硫酸铵的最终饱和度为65%~70%，冰浴20~30 min后高速离心，取沉淀；3）步骤2）所得沉淀用双蒸水溶解，加入pH5.0~6.0缓冲盐溶液使缓冲盐溶液的最终浓度为50~100毫摩尔/升，用双蒸水补足至与步骤1）中离心上清液相同的体积；4）步骤3）所得溶液中加入以pH5.0~6.0缓冲盐溶液溶解的分子量为3000~4500的聚乙二醇，使缓冲盐溶液最终浓度为50~100毫摩尔/升，聚乙二醇的最终质量体积比浓度为15~20%，冰浴20~30 min后，高速离心取上清液，得到1‑1型人血浆结合珠蛋白提取液。