[发明专利]柑桔黄脉病毒的RT-LAMP引物组、检测方法及试剂盒有效
申请号: | 201410620927.5 | 申请日: | 2014-11-06 |
公开(公告)号: | CN104328220A | 公开(公告)日: | 2015-02-04 |
发明(设计)人: | 刘科宏;周常勇;李中安;陈洪明;周彦 | 申请(专利权)人: | 西南大学柑桔研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙) 50211 | 代理人: | 谭春艳 |
地址: | 400712 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明涉及一种柑桔黄脉病毒的RT-LAMP引物组、检测方法及试剂盒,属于分子生物学技术领域。本发明提供了柑桔黄脉病毒RT-LAMP检测的外引物对F3、B3和内引物对FIP、BIP,以待测样品总RNA为模板,应用上述的内外引物对在60~63℃恒温反应条件下,进行环介导恒温扩增反应70~100min,扩增完成后80℃再反应5~10min,然后利用琼脂糖凝胶电泳或荧光染料染色,鉴定植株样品是否感染柑桔黄脉病毒。本发明操作简便、检测快速、不需要昂贵的核酸扩增仪器,几十分钟就可完成对RNA的检测,重复性好、准确性高、灵敏度高,适合田间样品的大规模测定和茎尖嫁接脱毒苗的快速评价。 | ||
搜索关键词: | 柑桔 病毒 rt lamp 引物 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种柑桔黄脉病毒的RT‑LAMP引物组,其特征在于:由外引物对F3、B3和内引物对FIP、BIP组成:外引物对:F3:5’‑TCCGGGGTAGACGAGAAC‑3’;B3:5’‑AGGTCCGTGCCATTTCCT‑3’;内引物对:FIP:5’‑CACATACAGGGAAGCGGGCGCGAAATTCGCGGCATTCG‑3’;BIP:5’‑AGAGACACCCTACTTCAGCGGAAGCGTTGGCAATTTTCACAG‑3’。
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