[发明专利]一种饲料用酿酒酵母菌高密度发酵培养基配方及其应用

摘要

本发明属于农业微生物技术领域，涉及一种饲料用酿酒酵母的高密度发酵培养基配方及其应用。培养基配方为：淀粉18‑22g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏10g/L、尿素10g/L、酵母提取物5g/L。其发酵工艺条件为温度25℃、pH值6‑6.5、通气量1.2:1的初始条件下发酵20‑24小时，在OD值在600nm波长下吸收值达到1.4之后2‑3小时开始以v/v计1:10进行补料。补料液的组成如下：淀粉100g/L、蔗糖25g/L、牛肉膏50g/L、尿素50g/L、酵母提取物25g/L。通过本发明的实施，酿酒酵母菌的发酵密度相对于YPED培养基活菌数增加7.3倍，菌体浓度达到了1.05×109 cfu/ml，菌体干重达到112 g/L。减少了蛋白胨和葡萄糖的用量，降低了生产成本，使之更加适合工业生产。

主权项

1.一种通过饲料用酿酒酵母进行高密度发酵方法，其步骤如下：1）菌种活化：将冷冻保存的酿酒酵母菌在YEPD琼脂平板上活化，挑取单菌接种于培养基液体试管，25℃培养12小时后，以v/v计1%转接于培养基液体试管，培养12小时后作为种子培养基；2）菌种培养：按培养基配方配制酿酒酵母高密度发酵培养基4500 ml装入发酵罐中，灭菌后将温度降至25℃；以v/v计5%的接种量将种子培养基接种于发酵罐中；3）发酵条件设定为：温度25℃，转速300rpm，pH值6‑6.5，通气量1.2：1，在此条件下发酵10‑14小时，当pH降低时则加入碱性中和剂NaOH调节，泡沫过多时加入5‑8克消泡剂吐温80；4）当发酵液OD值在600nm波长下吸收值达到1.4之后2‑4小时补料500ml；5）继续发酵48小时，收取菌体，该活菌数达到1.05×109cfu/ml，菌体干重达到112 g/L；其中，步骤1）所述的饲料用酿酒酵母菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为CGMCC No. 9436；其中步骤1）和步骤2）的培养基的组成为：按每升计，淀粉20g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏10g/L、尿素10g/L、酵母提取物5g/L，其余为水；步骤4）中的补料液组成为：淀粉100g/L、蔗糖25g/L、牛肉膏50g/L、尿素50g/L、酵母提取物25g/L，其余为水；以及步骤3）‑5）中不需要控制乙醇浓度。