[发明专利]一种用于四溴联苯醚快速检测的酶联免疫吸附分析方法

摘要

本发明公开了一种2，2’，4，4’-四溴联苯醚(BDE-47)的酶联免疫检测方法，改造BDE-47分子结构，设计合成半抗原C₁₅H₉Br₃O₃和C₁₁H₁₃Br₂O₃N，分别与牛血清白蛋白、卵清白蛋白偶联得到免疫原和包被原。对新西兰大白兔进行7次免疫后取得特异性抗血清。ELISA法测定抗体效价为1∶400000，检出限为0.01mg/L，定量限为0.023mg/L，IC₅₀为0.108mg/L。所建立的对BDE-47的间接竞争抑制ELISA方法，具有灵敏、快速、特异性强等优点，在对大量环境样品的进行初期筛选时很有优势，可大幅提高监测工作效率，降低监测成本，为仪器检测提供有效依据。

主权项

一种2，2’，4，4’‑四溴联苯醚(BDE‑47)半抗原及其合成方法，其特征在于：选择C₁₅H₉O₃Br₃为半抗原，其合成步骤为：(1)称取1201.2mg(5mmol)的磷酰基乙酸三乙酯于250ml锥形瓶，加入10mlTHF，另加入280mg氢化钠，在冰浴器中搅动反应20min；(2)称取3‑溴‑4‑氟苯甲醛3.24g(16mmol)，再称取2，4‑二溴苯酚4g，(16mmol)溶于20ml二甲基乙酰胺中，反应2h；(3)称取已制得的3‑溴‑4‑(2，4‑二溴苯氧基)苯甲醛2000mg(4.6mmol)，与上步骤冷却过后的混合物进行反应3‑4h；(4)秤取1570mg(37.5mmol)的LiOH·H2O加入1，4‑二氧六环与水的混合液50ml(体积比1∶1)中，将合成物质水解24h；分离纯化后得到白色晶体态半抗原C₁₅H₉O₃Br₃。