[发明专利]一种大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法

摘要

本发明公开了一种大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法，属于生物质纯化技术领域。为解决现有技术中纯化大豆球蛋白碱性多肽时处理时间长、产率低、且操作条件复杂的问题。本发明采用微生物膜吸附法纯化富集大豆球蛋白碱性多肽，针对其抗菌特性，菌体与大豆球蛋白碱性多肽溶液经振荡处理，菌体与大豆球蛋白碱性多肽产生吸附作用。本发明操作简单，处理条件温和，产量高，纯度高，可得到具有高活性的大豆球蛋白碱性多肽。使用本发明大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法纯化得到的大豆球蛋白碱性多肽的纯度达95%以上，得率达80%以上。

主权项

一种大豆球蛋白碱性多肽的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：1）取浓度为5×108‑2×109cfu/mL的葡萄球菌菌液，离心收集菌体；2）用磷酸盐缓冲液洗涤步骤1）中离心收集的菌体以除去培养基，收集洗涤后的菌体；3）取粗大豆球蛋白碱性多肽，加入磷酸盐缓冲液，搅拌均匀，配制成1‑2 mg/mL的大豆球蛋白碱性多肽溶液；4）将步骤2）中洗涤后的菌体重悬于步骤3）配制的大豆球蛋白碱性多肽溶液中，该大豆球蛋白碱性多肽溶液中菌体浓度为1.1×108‑2×108cfu/mL，在36‑38℃下振荡处理20‑40min；5）振荡处理结束后，所得溶液采用微孔滤膜滤除滤液，然后采用磷酸盐缓冲液反向冲洗滤膜，使菌体重悬于磷酸盐缓冲液中，得到菌悬液；6）将步骤5）所得菌悬液进行超声处理，离心，保留上清液；步骤6）中超声处理时，电功率为300W，频率为25Hz，每次作用时间3s间隙时间为4s，共循环作用10‑12次；7）将步骤6）所得上清液冷冻干燥，得纯化的大豆球蛋白碱性多肽。