[发明专利]大泷六线鱼卵黄原蛋白免疫印迹试剂盒及其制备方法、检测方法及应用有效
| 申请号： | 201410644566.8 | 申请日： | 2014-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN104316706A | 公开（公告）日： | 2015-01-28 |
| 发明（设计）人： | 王骏;王松;张铁军;冷凯良;苗钧魁;姜勇;罗忻;吴振兴 | 申请（专利权）人： | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/531 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 褚庆森 |
| 地址： | 266002 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测大泷六线鱼卵黄原蛋白的免疫印迹试剂盒及其制备方法、检测方法及应用。该试剂盒含有大泷六线鱼卵黄原蛋白纯品与兔抗大泷六线鱼卵黄原蛋白多克隆抗体。制备时，首先利用硫酸铵沉淀与SephadexG-200过滤层析从17β-雌二醇诱导的大泷六线鱼血浆中纯化出卵黄原蛋白，然后免疫新西兰大白兔制备兔抗大泷六线鱼卵黄原蛋白多克隆抗血清，并利用HitrapProteinG层析，纯化获得兔抗大泷六线鱼卵黄原蛋白多克隆抗体。本发明的试剂盒可以用于海洋环境雌激素类物质的筛选，能够灵敏、方便的定性检测大泷六线鱼血液、体表粘液、肝脏组织及肝细胞培养液中的卵黄原蛋白，最低检测限为50ngmL-1，为我国近岸海域内分泌干扰物的检测提供了重要工具。 | ||
| 搜索关键词： | 大泷六线 鱼卵 蛋白 免疫 印迹 试剂盒 及其 制备 方法 检测 应用 | ||
【主权项】：
一种检测大泷六线鱼卵黄原蛋白的免疫印迹试剂盒，包括一个盒体，该盒体内装有：1)PVDF膜2张；2)辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗1支；3)封闭液、洗涤液、显色液各1支，所述的洗涤液为TBST；封闭液为含5%脱脂奶粉的TBST；显色液为含0.06%(m/V) 3’‑二氨基联苯胺的10mM Tris‑HCl；其特征在于该盒体还装有：4) 大泷六线鱼卵黄原蛋白纯品1支，5) 兔抗大泷六线鱼卵黄原蛋白多克隆抗体1支。
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