[发明专利]一种利用香蕉茎尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法

摘要

本发明公开了一种利用香蕉茎尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法。巴西蕉茎尖薄片的EMS诱变及枯萎病菌粗毒素连续筛选育种技术，利用香蕉茎尖薄片为外植体，先对其进行化学诱变处理，获得再生植株；再生植株再以香蕉茎尖薄片在枯萎病粗毒素为选择压力进行抗性诱导和筛选，香蕉薄片诱导组合为以4mg/L的6-BA和0.2mg/L的IAA激素配合，EMS处理以200mMol/L浓度和处理30min；得到存活香蕉苗继续以茎尖薄片在香蕉枯萎病粗毒素为选择压力进行连续枯萎病抗性筛选，进而显著提高香蕉植株枯萎病抗性，平均提高25%-30%，实现本发明培育枯萎病抗性香蕉植株所需时间较短、效率较高，具有广泛的应用价值。

主权项

一种利用香蕉茎尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法，其特征在于,采用的方法步骤具体如下：（1）巴西蕉茎尖薄片的EMS诱变：将直接购买的巴西蕉(Musa AAA Cavendish subgroup CV．Brazil)吸芽在无菌条件下将切好的巴西蕉茎尖2‑3mm左右薄片，其中根部薄片弃之，直接泡在含EMS诱变剂中处理30min；（2）香蕉茎尖薄片的枯萎病粗毒素多轮连续筛选：经EMS突变处理后的巴西蕉茎尖薄片植入到设置的培养基中，在27℃，光照周期12（光照）/12（黑暗）条件下培养30天，诱导出再生植株；将存活的再生植株继续切成薄片加有含40µg/ml镰刀菌酸浓度的香蕉枯萎病粗毒素的上述设置的培养基为选择压力诱导再生植株，同样条件培养，诱导出再生植株再切成薄片以同样条件连续筛选诱导7轮，PH至5.8;所述的设置培养基含MS基本盐十30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂粉+改良的维生素/氨基酸溶液+4mg/L的6‑BA和0.2mg/L的IAA;（3）再生苗生根：连续筛选诱导7轮后的无菌苗接入生根培养基，40天后长出完整根系后方可进行炼苗，并最终获得枯萎病抗性得到显著提高的香蕉苗植株。