[发明专利]一种以氯霉素为筛选标记的毕赤酵母表达载体及其应用在审
申请号: | 201410653593.1 | 申请日: | 2014-11-18 |
公开(公告)号: | CN104388461A | 公开(公告)日: | 2015-03-04 |
发明(设计)人: | 井申荣;马贵兴;黄芬;曾韦锟 | 申请(专利权)人: | 昆明理工大学 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/65;C12N1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 650093 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开了一种以氯霉素为筛选标记的毕赤酵母表达载体,其是基于氯霉素的毕赤酵母筛选体系,本发明发现氯霉素对毕赤酵母GS115有明显的抑制作用,在含有氯霉素的YPG抗性固体培养基上不能生长,在此基础上,构建了一种利用氯霉素作为筛选抗生素的毕赤酵母筛选体系。利用含有氯霉素抗性基因CAT的载体,以及本发明中方法制备的毕赤酵母电转感受态和氯霉素筛选固体培养基进行筛选,用EGFP作为报告基因,转化毕赤酵母后在荧光显微镜下能够观察到绿色荧光,表明该载体及筛选体系能够有效地进行毕赤酵母转化筛选及外源蛋白表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 氯霉素 筛选 标记 酵母 表达 载体 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种以氯霉素为筛选标记的毕赤酵母表达载体,其特征在于:由氯霉素抗性基因CAT替换了毕赤酵母表达载体上的真核细胞筛选基因,形成含有氯霉素抗性基因CAT的表达载体。
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