[发明专利]生鲜果蔬食品中致病菌检测试剂盒及检测方法

摘要

生鲜果蔬食品中致病菌检测试剂盒，各组分组成及浓度为：⑴检测金黄色葡萄球菌的引物⑵检测沙门氏菌的引物⑶检测大肠杆菌的引物⑷镁盐⑸脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)⑹10×聚合酶链式反应(PCR)反应缓冲液⑺水生栖热菌(Taq)DNA聚合酶，灭菌无离子水补足体积至50.0μL。检测方法(1)取样品放入无菌均质袋中，取上清作为聚合酶链式反应(PCR)模板液；(2)将待检样品菌体制备的基因组DNA模板添加到检测试剂盒中；(3)将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。本发明针对生鲜果蔬食品中主要致病菌，一次可检测金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌三种致病菌，检测时间由常规检测的3-5天，缩短为聚合酶链式反应(PCR)检测的30小时以内，省时省力，节约检测成本。

主权项

生鲜果蔬食品中致病菌检测试剂盒，其特征在于:各组分组成及浓度为：⑴检测金黄色葡萄球菌的引物：上游引物5’‑TGC GAA ACA TCC ACG ACA TA‑3’，下游引物5’‑CGT TTG TGC TGA TTT CCC TAC‑3’，浓度为0.5～2.0μmol/L⑵检测沙门氏菌的引物：上游引物5’‑GTG AAA TTA TCG CCA CGT TCG GGC AA‑3’，下游引物5’‑TCA TCG CAC CGT CAA AGG AAC C‑3’，浓度为0.5～2.0μmol/L，⑶检测大肠杆菌的引物：上游引物5’‑GGC GGA TAA GAC TTC GGCTA‑3’，下游引物5’‑CGT TTT GGC ACT ATT TGC CC‑3’，浓度0.5～2.0μmol/L，⑷镁盐，浓度为1.0～2.0μmol/L，⑸脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)，浓度为0.15～0.25μmol/L，⑹10×聚合酶链式反应(PCR)反应缓冲液5.0μL，⑺水生栖热菌(Taq)DNA聚合酶1.0～3.0U，用灭菌无离子水补足体积至50.0μL。