[发明专利]一种无标记化学发光免疫传感器及其免疫分析方法

摘要

本发明公开了一种无标记化学发光免疫传感器及其免疫分析方法，一种无标记化学发光免疫传感器的免疫分析方法包括如下步骤：(1)将所述免疫传感器固定在免疫微反应器后，将带抗原样品以0.5ml/min的速度注入流通池，在线温育后形成免疫复合物；(2)用缓冲液PBST以1ml/min的速度冲洗免疫复合物，除去未反应的免疫试剂；(3)将化学发光底物溶液以0.5ml/min的速度通入免疫传感器，产生的化学发光信号由光电倍增管记录。本发明以化学发光探针和无标记的抗体共固定于具有良好生物相容性的固相界面，制得该免疫传感器，结合流动注射，构建了一种廉价、快速、方便的无标记化学发光免疫分析方法。

主权项

一种无标记化学发光免疫传感器的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将玻璃片在水虎鱼酸中浸泡10‑12h，用蒸馏水充分清洗后，在氮气气氛中吹干，浸泡在1％的γ‑(2,3环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷GPTMS的甲苯溶液中进行硅烷化反应，室温下放置10‑12h；(2)硅烷化反应后，先后用甲苯和乙醇冲洗并在氮气气氛下吹干；(3)将金纳米粒子溶液和2.0wt％壳聚糖溶液混合后超声至完全分散，然后与化学发光探针、抗体溶液相混合；取上述混合溶液，将其滴涂到环氧硅烷化的玻璃片表面，并在室温下反应0.5‑1h，然后在4℃下放置10‑12h；(4)用缓冲液PBST冲洗三次，并在4℃下用封闭液封闭10‑12h，制得免疫传感器。