[发明专利]一种荧光定量PCR检测穿刺巴斯德芽菌的方法在审
| 申请号： | 201410686868.1 | 申请日： | 2014-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN104745682A | 公开（公告）日： | 2015-07-01 |
| 发明（设计）人： | 邹潇潇;鲍时翔;黄惠琴;朱军;刘敏;孙前光;贺乐;林勇;郑业辉 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所;海南正维尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 571101 *** | 国省代码： | 海南;46 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明以穿刺巴斯德芽菌基因组内单拷贝的spoIIAB基因为靶点，采用荧光定量PCR技术快速检测样品中穿刺巴斯德芽菌的数量其动态变化。包括(1)对穿刺巴斯德芽菌芽胞进行破壁；(2)提取穿刺巴斯德芽菌的基因组DNA，并利用spoIIAB基因特异性引物进行PCR得到目的片段，并制作质粒标准品；(3)标准曲线的绘制及spoIIAB基因特异引物扩增效果检测；(4)待测样品中穿刺巴斯德芽菌的定量检测及灵敏度评价利用已知拷贝的质粒标准品绘制标准曲线，然后根据标准曲线计算待测样品中穿刺巴斯德芽菌的含量，并评价可检测的穿刺巴斯德芽菌最低浓度。该方法对穿刺巴斯德芽菌的特异性好，并且具有操作简单、灵敏度高、检测结果准确等优点，在对该菌的定量检测领域具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 定量 pcr 检测 穿刺 巴斯德芽菌 方法 | ||
【主权项】：
一种荧光定量PCR检测穿刺巴斯德芽菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)对穿刺巴斯德芽菌芽胞进行破壁；(2)提取穿刺巴斯德芽菌的基因组DNA，并以单拷贝的spoIIAB基因为靶点，利用基因特异性引物进行PCR得到目的片段，并制作质粒标准品；(3)标准曲线的绘制及spoIIAB基因特异引物扩增效果检测；(4)待测样品中穿刺巴斯德芽菌的定量检测及灵敏度评价。
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