[发明专利]检测染色体非整倍体数目异常的扩增组合物及快速检测试剂盒

摘要

本发明涉及检测染色体非整倍体数目异常的扩增组合物及快速检测试剂盒，属于生物技术领域。本发明在高度复合的扩增体系中可以扩增检测8个21号染色体、6个18号染色体、6个13号染色体和3个X染色体相关的STR位点，同时扩增检测4个性别位点。且通过定量荧光PCR(QF-PCR)技术扩增上述所有位点，对21、18、13、X和Y染色体非整倍体数目异常进行检测。本发明试剂盒，检测周期短，获得样本后5小时就可以可得到结果，灵敏度高，每次检测只需纳克级别的DNA，相当于100个细胞所含的DNA量，因此需要的样本量少，需要1-2ml的羊水即可满足需求。由于灵敏度较高，三体细胞占10％以上的嵌合体就可以被检出。

主权项

检测染色体非整倍体数目异常的扩增组合物，其特征在于：所述扩增组合物中包括27对引物，可同时扩增23个与21、18、13、X染色体非整倍体数目异常检测相关的STR位点和4个Y染色体非整倍体数目异常检测相关位点：D13S256、D13S797、DXS6809、DXS9895、D21S2052、D18S51、AMEL、D18S535、D13S317、D21S1411、D18S1002、D21S1446、D13S305、TAF9L、D18S877、LFG21、ZFXY、D18S851、D21S1435、SRY、D21S11、D18S391、D13S800、D21S1246、XHPRT、D13S325和Penta D，所述引物分别为：扩增D13S256的引物：引物1：AAGAGCAAAACTCCATCTCGATAG，引物2：TACTTATAAGCAGAGAGACATAA；扩增D13S797的引物：引物1：TTTTGGTTTGCTGGCATCTG，引物2：TTGTCTGGAGGCTTTTCAGTC；扩增DXS6809的引物：引物1：TGTTTCCATCTTTCTCTGAAC，引物2：GAATCCAATTTTGCTTTAGGC；扩增DXS9895的引物：引物1：CCATGATTCAAATTATCTCCCACC，引物2：CCATCATTTGCCTTGAGAAAA；扩增D21S2052的引物：引物1：ACTGTACAGAGGTTCTCCGGGCA，引物2：CATGTCTTGAGCCTTCCAGCTCTCT；扩增D18S51的引物：引物1：TTCACTCTGAGTGACAAATTGA，引物2：CATTAAGCTCACTTTAGCCG；扩增AMEL的引物：引物1：CACCAGCCAAACCTCCCTCCGC，引物2：GCTGCATGGGGTGCACAGGTG；扩增D18S535的引物：引物1：ACAAAAGCCACACCCATAAC，引物2：GAAATATAGATGAGAATGCAGAGA；扩增D13S317的引物：引物1：TATCACAGAAGTCTGGGATG，引物2：AAAAAGACAGACAGAAAGAT；扩增D21S1411的引物：引物1：AATATGATGAATGCATAGATGG，引物2：CCCACTCCCAGCCTTCTAAATAT；扩增D18S1002的引物：引物1：AGGAAGCTATCTATACAAAGAGTG，引物2：AAGATGTGAGTGTGCTTTTCAGGAG；扩增D21S1446的引物：引物1：TATTGCCTAGTGATGTTGTAGCC，引物2：AGAATATGTCCCAAAGGACCTGC；扩增D13S305的引物：引物1：CCTGTTTGAGGACCTGTCGTTA，引物2：TCGAAATCCTAGGCTTGAGTAA；扩增TAF9L的引物：引物1：TTTGACAGGTAGTTTTGGGTCA，引物2：CTACAGCATCTCTGTTAAATTTAGA；扩增D18S877的引物：引物1：ATAGATGATAGAGATGACACATGA，引物2：TTTCTTCATACATGCTTTATCATGC；扩增LFG21的引物：引物1：AATCATGACACTAATTTTGG，引物2：AGTTCAGGGAAGCCTCAAGG；扩增ZFXY的引物：引物1：TGGACTCAGATGTAACTGAAGAAGT，引物2：TACCAATACTTCTTCTGAAACTACG；扩增D18S851的引物：引物1：TCTCTCTGTCCTCTAGGCTCATTTAGC，引物2：TGAGATAGTTTAAATAGTTTGCC；扩增D21S1435的引物：引物1：CTCAGCACATTCTCCTCTAGATTTA，引物2：AAAGCAAGAGATTTCAGTGCCATC；扩增SRY的引物：引物1：TTCCTTTGCACTGAAAGCTGTA，引物2：TGTCCAGTTGCACTTCGCTGC；扩增D21S11的引物：引物1：ACTTCTGGAGATGGAACACTTTT，引物2：TTGTATTAGTCAATGTTCTCCAGAG；扩增D18S391的引物：引物1：TTGAGGAAGAGAGAAATAGAGAGA，引物2：CTATTCCCATCTGAGTCACTCAGC；扩增D13S800的引物：引物1：AGGTAGGTAGGTAAATAGCTAGAT，引物2：ACTGGCTTTCCTCTTCCTTCCTTA；扩增D21S1246的引物：引物1：AAAGTAGACAGGTAAACATACA，引物2：TCATCCATCCATCCACCTATCT；扩增XHPRT的引物：引物1：TTGAGGTATACTTTTCTCTCCAGAAT，引物2：TAATACACATCCCCATTCCTGCC；扩增D13S325的引物：引物1：TTCCTAATTTCCCCTGTTACTGGAA，引物2：CTCCAACGGTCATTAAAAAC；扩增Penta D的引物：引物1：GAAGGTCGAAGCTGAAGTGAGCC，引物2：GTAAGAATTCTTTAATCTGGACACAAG。