[发明专利]一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用。本发明公开一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法，是将重组融合蛋白和脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL在O‑抗原连接酶基因缺陷的细菌中共表达，脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL将细菌自身的多糖或外源多糖连接到重组融合蛋白上，得到细菌多糖修饰的重组融合蛋白。采用本发明的方法制备的细菌多糖修饰的重组融合蛋白免疫小鼠，可获得抗细菌多糖的特异性抗体，将这种细菌多糖修饰的重组融合蛋白用于细菌多糖蛋白结合疫苗的制备，可以避免病原菌培养的诸多问题，提高疫苗的均一性以及生产效率，降低疫苗制备的成本。

主权项

1.一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法，是将重组融合蛋白和脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL在O‑抗原连接酶基因缺陷的细菌中共表达，脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL将细菌自身的多糖连接到所述重组融合蛋白上，得到所述细菌多糖修饰的重组融合蛋白；所述重组融合蛋白含有N端信号肽、具有脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL的糖基化位点的肽段和载体蛋白序列；所述O‑抗原连接酶基因缺陷的细菌为O‑抗原连接酶基因缺陷的福氏志贺氏菌、O‑抗原连接酶基因缺陷的甲型副伤寒沙门氏菌；所述载体蛋白为细菌毒素蛋白的无毒突变体或细菌毒素蛋白的部分片段；所述细菌毒素蛋白的无毒突变体为绿脓杆菌外毒素蛋白A无毒突变体；所述细菌毒素蛋白的部分片段为霍乱毒素B亚单位或破伤风毒素C蛋白；所述具有脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL的糖基化位点的肽段为含有脑膜炎奈瑟球菌菌毛蛋白PilE的自N端起第55位至第66位的任意肽段。