[发明专利]一种适用于磷酸肌酸酶法生产工艺的肌酸激酶突变体无效
| 申请号： | 201410716476.5 | 申请日： | 2014-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN104357420A | 公开（公告）日： | 2015-02-18 |
| 发明（设计）人： | 蔺宗;吴学强;周海梦;姚玲 | 申请（专利权）人： | 杭州清科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 311231 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及利用基因工程技术对兔肌肌酸激酶进行突变和改造，以改善肌酸激酶在磷酸激酶生产中作为反应催化酶的性能表现。所述方法是利用基因工程技术对兔肌肌酸激酶进行多点突变，以改善肌酸激酶在磷酸肌酸生产中的表现，如酶催化能力、底物亲和力、耐酸碱能力、热稳定性等。本发明的优点在于通过酶突变改造可以极大的提高肌酸激酶在pH8～10，在25～45℃下的磷酸肌酸酶法生产工艺环境中的催化能力，提高了生产效率，降低了生产成本，对于促进酶法生产磷酸肌酸产业有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适用于 磷酸肌酸 生产工艺 肌酸激酶 突变体 | ||
【主权项】：
一种适用于磷酸肌酸生产使用的突变肌酸激酶的改造方法，其特征在于该方法包括：用基因工程方法对兔肌肌酸激酶的关键功能位点进行定点突变，将合成的肌酸激酶基因连至克隆载体，转化克隆大肠杆菌，筛选得到正确的克隆载体，重组构建含有编码突变肌酸激酶核苷酸序列的表达载体，转入表达型大肠杆菌，构建重组工程菌株，诱导表达。
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