[发明专利]使用编码靶向核酸内切酶附着体载体的基因组编辑方法及试剂盒在审

专利信息
申请号: 201410733267.1 申请日: 2014-12-08
公开(公告)号: CN104450785A 公开(公告)日: 2015-03-25
发明(设计)人: 王永明;麦瑞天;陈少波 申请(专利权)人: 复旦大学
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12Q1/68
代理公司: 上海正旦专利代理有限公司 31200 代理人: 陆飞;盛志范
地址: 200433 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明属于生物基因工程技术领域,具体为一种使用编码靶向核酸内切酶附着体载体的基因组编辑方法及试剂盒。本发明利用附着体载体表达靶向核酸内切酶,附着体载体可以实现非整合的稳定的基因表达,同时表达筛选基因;通过药物筛选可以除去没有得到质粒的细胞;当编辑完成后撤掉药物,细胞会逐渐丢掉附着体载体,这样就得到了不含外源基因的编辑细胞系。本方法延长了编辑的时间,提高了基因编辑效率。本发明还提供用于编辑细胞中特定染色体序列的试剂盒。本发明适用于各种真核生物细胞的基因组编辑。
搜索关键词: 使用 编码 靶向 核酸 内切酶 附着 载体 基因组 编辑 方法 试剂盒
【主权项】:
一种用于修饰细胞的基因组编辑方法,其特征在于具体步骤为:首先,构建一个附着体载体编码靶向核酸内切酶和筛选基因;然后,将所述附着体载体导入到细胞中,在药物的筛选下培养细胞若干天,使所有的细胞中都含有附着体载体并稳定表达靶向核酸内切酶。
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