[发明专利]一种能提高达玛烯二醇转化效率的融合蛋白质及构建方法在审
申请号: | 201410736992.4 | 申请日: | 2014-12-04 |
公开(公告)号: | CN104498577A | 公开(公告)日: | 2015-04-08 |
发明(设计)人: | 卢文玉;赵方龙 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12P33/00 | 分类号: | C12P33/00;C12N15/70;C12N9/02;C12R1/865 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 陆艺 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种能提高达玛烯二醇转化效率的融合蛋白质及构建方法,构建方法为:①将拟南芥中细胞色素-NADPH-还原酶1基因AtCPR1的5’端的前138个碱基切除,得到SEQ ID NO.2所示序列;②将以SEQ ID NO.3所示的人参中原人参二醇合酶基因PPDS的3’端终止密码子TAA去除,与SEQ ID NO.2所示序列的5’端用编码多肽GGG的碱基序列连接,构建出融合蛋白质的基因元件;③将融合蛋白质的基因元件与酿酒酵母细胞内源启动子和终止子连接,构建融合蛋白质基因表达盒,并转化进入酿酒酵母细胞表达。本发明的融合蛋白质,能使达玛烯二醇到原人参二醇的转化效率提高。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 达玛烯二醇 转化 效率 融合 蛋白质 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种能提高达玛烯二醇转化效率的融合蛋白质的构建方法,其特征是包括如下步骤:①将拟南芥中细胞色素‑NADPH‑还原酶1基因AtCPR1的5’端的前138个碱基切除,得到SEQ ID NO.2所示序列,所述拟南芥中AtCPR1基因以SEQ ID NO.1所示;②将以SEQ ID NO.3所示的人参中原人参二醇合酶基因PPDS的3’端终止密码子TAA去除,与SEQ ID NO.2所示序列的5’端用编码多肽GGG的碱基序列连接,构建出PPDS‑linker3‑AtCPR1融合蛋白质的基因元件;③将PPDS‑linker3‑AtCPR1融合蛋白质的基因元件与酿酒酵母细胞内源启动子和终止子连接,构建PPDS‑linker3‑AtCPR1融合蛋白质基因表达盒,并转化进入酿酒酵母细胞表达。
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