[发明专利]一种抗神经炎细胞抗体的制取工艺在审
申请号: | 201410741466.7 | 申请日: | 2014-12-09 |
公开(公告)号: | CN105884894A | 公开(公告)日: | 2016-08-24 |
发明(设计)人: | 晏健强 | 申请(专利权)人: | 晏健强 |
主分类号: | C07K16/28 | 分类号: | C07K16/28;C07K16/06 |
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地址: | 537000 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开了一种抗神经炎细胞抗体的制取工艺,其工艺步骤为:(1)神经炎细胞的提取与培养;(2)乳化;(3)动物免疫:运用DNA重组技术,将荧光蛋白基因重组到免疫细胞分泌抗体的基因序列中,得到重组细胞,纯化培养,取10‑8重组细胞悬液备用;(4)抽取血清;(5)缓冲液的配制;(5)纯化,本发明的一种抗神经炎细胞抗体能用于制备检测或诊断多发性神经炎疾病,能同时针对神经炎细胞表面的多个抗原,增强了临床神经炎患者的治疗效果,制取周期短,稳定性高,适于推广应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 神经炎 细胞 抗体 制取 工艺 | ||
【主权项】:
一种抗神经炎细胞抗体的制取工艺,其特征在于,其工艺步骤如下:(1)神经炎细胞的提取与培养:从BALA/C纯种小白鼠体内提取神经炎细胞,体外培养,取对数生长神经炎细胞离心,用无血清培养液洗3次,计数,取得10‑7细胞备用;(2)乳化:计数取神经炎细胞10‑5,与油佐剂混合,制得免疫混合物,所述油佐剂包括白油、硬脂酸铝和司本80,所述白油、硬脂酸铝和司本80的用量分别为80ml、3g和5ml;(3)动物免疫:向动物体内注射免疫混合物,然后每隔一周向动物体内注射,每次注射之前测量血液抗体滴度,当抗体滴度达到1∶1000‑2500,终止免疫;(4)抽取血清:终止免疫后取动物血液,静置1‑2h后离心,取上清液,得到含神经炎抗体的血清;(5)缓冲液的配制:取磷酸二氢钠20ml和NaCl1.5ml,制得缓冲液,控制其pH为7.2‑9.0;(5)纯化:将步骤(4)得到的血清填柱处理,用步骤(5)制取的缓冲液洗柱子,收集洗脱液,透析,收集透析之后的液体,冻干之后即得神经炎细胞抗体。
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