[发明专利]一种通过引入聚-β-羟基丁酸酯代谢途径提高钝齿棒杆菌L-精氨酸产量的方法在审
| 申请号： | 201410748914.6 | 申请日： | 2014-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN104531747A | 公开（公告）日： | 2015-04-22 |
| 发明（设计）人： | 饶志明;秦敬儒;徐美娟;张显;杨套伟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/77 | 分类号： | C12N15/77;C12N15/66;C12N1/21;C12P13/10;C12R1/15 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 通过引入PHB代谢途径到Corynebacterium crenatum SYPA中，从而高产L-精氨酸，属于基因工程和生物工程领域。该发明酶切质粒pBHR68获得合成PHB的操纵子，与棒杆菌表达载体pDXW-10连接，并将其在C.crenatum SYPA中表达，为国内外首次通过引入PHB代谢途径在野生型钝齿棒杆菌中高产L-精氨酸。对构建的基因工程菌株进行酶活力测定及胞内辅酶水平研究证明C.crenatum SYPA/pDXW-10-phbCAB合成L-精氨酸的能力得到加强。最终在30℃，pH 7.0及600rpm条件下，C.crenatum SYPA/pDXW-10-phbCAB在5-L发酵罐发酵96h可产得43.21 g/L的L-精氨酸，为国内外首次通过引入PHB代谢途径到菌体内，调节胞内代谢网络，最终实现高产L-精氨酸的目的，为微生物工业化生产L-精氨酸提供了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通过 引入 羟基 丁酸 代谢 途径 提高 钝齿棒 杆菌 精氨酸 产量 方法 | ||
【主权项】：
一种高产L‑精氨酸的重组钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)，其特征在于：将SEQ ID NO：1所示的Ralstonia eutropha H16的聚‑β‑羟基丁酸(PHB)合成操纵子基因phbCAB从pBHR68上酶切下来，连接到穿梭表达载体pDXW‑10，构建成为重组表达质粒pDXW‑10‑phbCAB并转化至钝齿棒杆菌C.crenatum SYPA中，经发酵罐实验验证,重组钝齿棒杆菌提高了生产L‑精氨酸的能力。
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