[发明专利]利用猪肺联产高纯度肝素钠和硫酸皮肤素的方法

摘要

本发明提供了一种利用猪肺联产高纯度肝素和高纯度硫酸皮肤素的方法，本发明以猪肺为原料，通过酶解、离子交换、分级洗脱、浓缩、乙醇沉淀生产高纯度的肝素钠以及高纯度的硫酸皮肤素。通过离子交换的分步洗脱得到两步洗脱液，以超滤法除盐并浓缩，再进行一步醇沉即得到高纯度肝素与硫酸皮肤素。在离子交换树脂的洗脱中使用了梯度的氯化钠溶液洗脱，从而使肝素和硫酸皮肤素能在不同的洗脱液浓度下分离下来，达到了肝素与硫酸皮肤素的分离，并且分别提高了肝素和硫酸皮肤素的纯度，且效价也有了提高，纯度、效价及旋光度均符合药典要求。本发明工艺简单，成本低，收益高，可大大增加生产经济效益。

主权项

本发明提供的从猪肺中提取硫酸皮肤素的方法，包括以下步骤 ：步骤一 取新鲜的猪肺绞碎成猪肺浆料，加入1‑2倍重量的去离子水搅拌1‑2小时，得肺浆液；步骤二 将步骤一得到的猪肺浆液中加入占总液体重量2.5‑3.5%的氯化钠，调pH至10‑11，搅拌均匀，在25‑30℃下间歇搅拌反应4‑8小时，得到猪肺碱解液；步骤三 将步骤二得到的猪肺碱解液缓慢加热至40‑45℃，调pH至8‑10，加入占猪肺浆料重量0.05‑0.15%的肝素钠复合蛋白酶，搅拌均匀，保温反应2‑3小时后，缓慢加温至50‑60℃，保温反应2‑3小时，再加热至80‑85℃，保温0.5‑1小时得到猪肺酶解液；步骤四 将步骤三所得的酶解液降温至 55 ～ 57℃后加入树脂，搅拌吸附 8 小时，用 80 目尼龙布过滤袋将树脂滤出收集 ；步骤五 将步骤四中收集的树脂用浓度为 2%‑5% 的氯化钠溶液洗涤 30 ～ 40 分钟，洗去蛋白等杂质 ；步骤六 将步骤五洗净的树脂用浓度为 5% ～ 10% 的氯化钠溶液两次洗脱树脂，收集洗脱液 A ；最后用浓度为 20%‑24% 的氯化钠溶液三次洗脱树脂，收集洗脱液 B ；步骤七 将步骤六获得的洗脱液A 以 1000Da 的超滤膜进行超滤，当体积浓缩 4.5 ～ 5.0 倍即可，得浓缩洗脱液 A1；步骤八 将步骤七所得浓缩洗脱液A1 中加入分析纯无水乙醇，使乙醇浓度达到 40 ～ 50％，出现白色沉淀物，通过离心，去除上清，将沉淀在 60℃烘箱中放置过夜，获得纯度为90～94％的硫酸皮肤素。