[发明专利]一种海胆多功能肌动蛋白的分离纯化方法在审
申请号: | 201410753306.4 | 申请日: | 2014-12-10 |
公开(公告)号: | CN104404008A | 公开(公告)日: | 2015-03-11 |
发明(设计)人: | 蒋经伟;董颖;陈仲;高杉;关晓燕;姜北;周遵春 | 申请(专利权)人: | 辽宁省海洋水产科学研究院 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C07K14/435;C07K1/26 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 王铎 |
地址: | 116023 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种海胆多功能肌动蛋白的分离纯化方法,其特征在于它包括以下步骤:(1)取海胆体腔液,经离心后取上清,获得体腔液上清;(2)以体腔液上清为样品进行非变性非还原的透析电泳;(3)透析电泳后再进行非变性非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳;(4)根据非变性非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳后海胆多功能肌动蛋白条带的特有颜色,对多功能肌动蛋白条带进行切胶,并通过凝胶破碎溶释法回收凝胶中的蛋白,得到纯化的海胆多功能肌动蛋白。本发明的优点在于:①纯化样品制备简单、快捷;②试剂和设备要求简单、易操作、步骤少、时间短;③纯化的样品具有高纯度和高蛋白活性。 | ||
搜索关键词: | 一种 海胆 多功能 肌动蛋白 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种海胆多功能肌动蛋白的分离纯化方法,其特征在于它包括以下步骤:(1)取海胆体腔液,经离心后取上清,获得体腔液上清;(2)将体腔液上清装入10kDa的透析袋中,封口后再将10kDa的透析袋放入0.1kDa的透析袋中,10kDa透析袋与0.1kDa透析袋之间填充电泳缓冲液后,封口;再将0.1kDa透析袋放入电泳缓冲液中进行非变性非还原的透析电泳;(3)透析电泳后以透析袋之间填充液体为样品进行非变性非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳;(4)根据海胆多功能肌动蛋白非变性非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳后的特有颜色,对多功能肌动蛋白条带进行切胶,并通过凝胶破碎溶释法回收凝胶中的蛋白,从而得到纯化的海胆多功能肌动蛋白。
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