[发明专利]一种无菌微量在线取样装置及取样方法

摘要

本发明涉及一种无菌微量在线取样装置及取样方法，取样装置由无菌微量取样探头、可调速取样泵系统、管路清洗灭菌系统、定量取样环、无菌微量取样探头防堵反吹系统组成，按取样流程方法，实现发酵罐微量在线取样。本发明的特点无菌取样，减少死体积，取样量微小，对发酵系统的影响极小，探头防堵反吹系统保障连续取样，管路清洗灭菌系统防染菌和液体残存。本方法适应于微生物发酵、细胞培养等生物反应器在线检测系统的微量液体在线取样。

主权项

1.一种无菌微量在线取样装置的取样流程方法，其特征在于：a)清除上次发酵液：打开夹阀二(6)，启动调速取样泵(15)，低转速转动，从发酵罐(1)经无菌微量取样探头(2)吸取取样探头死体积2‑5倍的样品溶液，然后关闭夹阀二(6)，打开夹阀三(7)，启动调速取样泵(15)高转速转动，从空气过滤器(11)吸取无菌空气，当前段液柱到达液体传感器(16)时，主控系统(20)修正调速取样泵(15)运行时间，直至排除上次发酵液至废液瓶(18)；b)乙醇灭菌清洗：关闭夹阀三(7)，开通夹阀四(8)，启动调速取样泵(15)，高速转动，从灭菌瓶(12)中吸取取样探头死体积4‑7倍的75％乙醇溶液，直至排除至废液瓶(18)；c)清洗剂清洗：关闭夹阀四(8)，开通夹阀五(9)，启动调速取样泵(15)，高速转动，从清洗瓶(13)中吸取0.1N氢氧化钠溶液、1倍PBS或3％Mucoso溶液，以上溶液的取样量为取样探头死体积的4‑7倍，直至排除至废液瓶(18)；d)蒸馏水清洗：关闭夹阀五(9)，开通夹阀六(10)，启动调速取样泵(15)，高速转动，从蒸馏水瓶(14)中吸取取样探头死体积4‑7倍的蒸馏水，直至排除至废液瓶(18)；e)本次发酵液取样：关闭夹阀六(10)，打开夹阀二(6)，启动调速取样泵(15)，低转速转动，从发酵罐(1)吸取样品体积为取样体积量1.5倍，然后关闭夹阀二(6)，打开夹阀三(7)，启动调速取样泵(15)高转速转动，从空气过滤器吸取无菌空气，当前段液柱到达液体传感器(16)时，修正调速取样泵(15)运行时间，直至取样环中充满新鲜发酵液，转换取样阀(17)，将设定取样体积的新鲜发酵液取到指定的取样瓶或者分析仪器(19)处，完成取样；f)循环取样：再次取样，重复以上a)‑e)步骤；g)无菌微量取样探头防堵反吹流程：取样流量低于设定下限时，关闭夹阀二(6)，打开夹阀一(3)，开启蠕动泵(4)，吸入无菌空气或者无菌水反吹冲洗，反冲完成时重复以上a)‑e)步骤取样。